【摘 要】
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目的建立1种特异、灵敏、高效的检测IBRV gE基因的荧光定量PCR方法,并为鉴别IBRV野毒株和gE基因缺失疫苗株的感染提供技术手段。方法根据IBRV gE基因保守序列,设计一对引物,
【机 构】
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内蒙古农业大学兽医学院,农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(30860202);内蒙古自然科学基金项目(2010BS0407)
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目的建立1种特异、灵敏、高效的检测IBRV gE基因的荧光定量PCR方法,并为鉴别IBRV野毒株和gE基因缺失疫苗株的感染提供技术手段。方法根据IBRV gE基因保守序列,设计一对引物,建立荧光定量PCR反应体系和反应条件,利用10倍梯度稀释病毒DNA进行荧光定量PCR扩增,以检测本试验建立的荧光定量PCR的灵敏度。用IBRV、牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒、MDBK细胞、牛血清等进行特异性检测。用模拟样品进行临床应用试验。结果本试验建立的荧光定量PCR方法,其灵敏度约为70 DNA拷贝/μL,除了IBRV
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