【摘 要】
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用正丁醇抽提、硫酸铵分级沉淀、EAE-32柱层析和Sephadex G-150凝胶过滤,从牛小肠中分离纯化出牛小肠碱性磷酸酶（BIAP）.提纯倍数为50.69,比活力为48.87U/mg蛋白.酶液经SDS-PAGE
【机 构】
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四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室;
【基金项目】
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“十一五”国家科技支撑计划重点项目(BAF07B01)
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用正丁醇抽提、硫酸铵分级沉淀、EAE-32柱层析和Sephadex G-150凝胶过滤,从牛小肠中分离纯化出牛小肠碱性磷酸酶（BIAP）.提纯倍数为50.69,比活力为48.87U/mg蛋白.酶液经SDS-PAGE呈现单一条带,且不含DNA核酸酶.该酶催化对硝基苯磷酸二钠（p-NPP）水解反应的最适pH值为9.7,pH小于6.5大于11.5均不稳定;最适温度为45℃,高于50℃不稳定.45℃,pH 9.7时Km值为0.29mmol/L,最大反应速度(Vmax)为4.6μmol/（L·min）.利用SDS-PAGE测定酶亚基的分子量为66 kD.Mg2+、Mn2+和Ca2+对酶有不同程度的激活作用,Zn2+和EDTA对酶有抑制作用.随着Mg2+、Zn2+和EDTA浓度增加,270nm处紫外吸收值增加.
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