探讨程序性细胞死亡因子4(PDCD4)对三氧化二砷(As2O3)诱导的神经母细胞瘤细胞生长和核因子κB(NF－κB)信号通路的抑制作用。
方法在神经母细胞瘤细胞中转染PDCD4过表达载体，以荧光定量PCR和Western blot方法测定过表达效果。将神经母细胞瘤细胞分为对照组、PDCD4组、As2O3组和As2O3＋PDCD4组，以四甲基偶氮唑蓝法测定细胞的增殖能力，克隆形成实验测定细胞克隆形成能力，流式细胞术测定细胞凋亡变化，Western blot法测定细胞中NF－κB p65和激活型caspase－3(cleaved caspase－3)蛋白的表达水平。
结果PDCD4过表达载体转染可以明显提高神经母细胞瘤细胞中PDCD4的表达水平。对照组、PDCD4组、As2O3组和As2O3＋PDCD4组细胞的存活率分别为100%、(72.14±5.20)%、(62.58±3.14)%和(40.87±2.47)%，克隆形成率分别为(91.25±8.36)%、(65.32±7.14)%、(57.23±5.28)%和(37.14±3.64)%，凋亡率分别为(3.57±0.24)%、(28.64±3.20)%、(36.41±4.58)%和(49.65±5.27)%。与对照组比较，PDCD4组、As2O3组和As2O3＋PDCD4组细胞的存活率、克隆形成率均明显降低(均P<0.05)，凋亡率明显升高(均P<0.05)，As2O3＋PDCD4组较PDCD4组和As2O3组变化更为显著(均P<0.05)。对照组、PDCD4组、As2O3组和As2O3＋PDCD4组cleaved caspase－3蛋白的表达水平分别为0.21±0.03、0.30±0.02、0.43±0.05和0.57±0.06，NF－κB p65蛋白的表达水平分别为0.68±0.04、0.52±0.03、0.43±0.04和0.32±0.02。与对照组比较，PDCD4组、As2O3组和As2O3＋PDCD4组细胞中NF－κB p65蛋白的表达水平均明显降低(均P<0.05)，cleaved caspase－3蛋白的表达水平均明显升高(P<0.05)，As2O3＋PDCD4组较PDCD4组和As2O3组变化更为显著(均P<0.05)。
结论PDCD4可增强As2O3对神经母细胞瘤细胞生长和NF－κB信号通路的抑制作用。