【摘 要】
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从大肠杆菌K12菌株中获得tyrB和aspA基因,将2个基因串联并克隆到pλPR质粒上,然后转化到E.coli P2392菌株进行表达.相应酶活力和氨基酸产量检测结果表明,单基因表达和双串联
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从大肠杆菌K12菌株中获得tyrB和aspA基因,将2个基因串联并克隆到pλPR质粒上,然后转化到E.coli P2392菌株进行表达.相应酶活力和氨基酸产量检测结果表明,单基因表达和双串联基因串联表达菌株的酶活性成倍提高,与原始菌株相比,AspA活力分别提高243%与239%,TyrB活力分别提高到247%和236%.以基因双串联表达菌株E.coli PBA的菌体悬浮液为酶原,以铵盐、反丁烯二酸和苯丙酮酸为酶转化底物,反应3 h后,苯丙酮酸转化苯丙氨酸的效率为93%,苯丙氨酸产率达到0.6g/(g·h)(细胞),是对照菌株的4.7倍.
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