【摘 要】
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目的 建立人类风湿性关节炎滑膜细胞永生细胞系。 方法 用重组有HPV16病毒E6 E7基因阅读框架的逆转录病毒载体转染原代培养的人类风湿性关节炎滑膜细胞 ,经G418筛选 ,获
【机 构】
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北京师范大学细胞增殖及调控生物学教育部重点实验室,中国医学科学院北京协和医院,中国医学科学院北京协和医院,北京师范大学细胞增殖及调控生物学教育部重点实验室,北京师范大学细胞增殖及调控生物学教育部重点实
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目的 建立人类风湿性关节炎滑膜细胞永生细胞系。 方法 用重组有HPV16病毒E6 E7基因阅读框架的逆转录病毒载体转染原代培养的人类风湿性关节炎滑膜细胞 ,经G418筛选 ,获取细胞克隆RASB ,并从形态学、生长特性、核型组成、致瘤性和分泌功能等多方面对建系细胞RASB进行生物学观察。 结果 实验和观察证实 ,转化滑膜细胞染色体整合HPV病毒DNA ,表达HPVE6蛋白 ,基本保留了B型滑膜细胞特征形态、细胞骨架和分泌功能 ,倍增时间缩短一半 ,对裸鼠无致瘤性 ,软琼脂培养形成细小集落。已稳定传代大于 10 0代。 结论 建立了能长期体外稳定传代的人类风湿性关节炎滑膜细胞系。此细胞系的建立将为类风湿关节炎致病机理的研究和治疗提供极有意义的体外细胞模型。
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