高效液相色谱(HPLC)对游离腺苷酸类的测定

来源 :哈尔滨医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mayflysnow
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腺苷酸类是参与遗传信息贮存、传递与表达的核酸“构件”分子,也是生物氧化、能量代谢中的能源物质,ATP 又是临床治疗脑血管意外、冠心病及心肌梗塞等的药物。因此对生物组织或体液中的游离腺苷酸类寻求简便、快速、灵敏的测定方法具有重要意义。我们采用自装“Permaphase AAX”的不锈钢柱2.1mm×100cm,理论塔板数为1110/米,流动相为0.005M 磷酸二氢钾(pH3.0)和0.5M 磷酸二氢钾(pH4.0),每分钟以3%线性浓度梯度洗脱。样品柱和参比柱的洗脱液流速分别是0.64ml/分和0.76ml/分,柱压50kg/cm~2,柱温为室温,记录器纸速10mm/分,检测敏度0.08AVFS,检测波长257nm。在上述条件下,三种标准腺苷酸混合溶液保留时间分别为AMP tr=2分44秒、ADP Adenosine is a “component” of nucleic acid involved in the storage, transmission and expression of genetic information. It is also an energy substance in biological oxidation and energy metabolism. ATP is also a drug for clinical treatment of cerebrovascular accidents, coronary heart disease and myocardial infarction. Therefore, the search for a simple, rapid and sensitive determination of free adenylate in biological tissues or body fluids is of great significance. We use a self-loading “Permaphase AAX” stainless steel column 2.1mm × 100cm, the theoretical plate number of 1110 / m, the mobile phase of 0.005M potassium dihydrogen phosphate (pH3.0) and 0.5M potassium dihydrogen phosphate (pH4.0 ), Eluted with a 3% linear concentration gradient every minute. The column and reference column eluant flow rates were 0.64ml / min and 0.76ml / min, column pressure 50kg / cm ~ 2, the column temperature was room temperature, the recorder paper speed 10mm / min, the detection sensitivity of 0.08AVFS, Detection wavelength 257nm. Under these conditions, the three standard adenylyl acid mixed solution retention time were AMP tr = 2 minutes and 44 seconds, ADP
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