【摘 要】
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采用改进的氯化苄法对红曲霉DNA进行提取纯化,探讨了提取液中EDTA的浓度以及其他因素对提取结果的影响.同时,以该法提取的DNA为模板,采用正交实验优化RAPD分析最佳反应条件.
【机 构】
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江西中德联合研究院,南昌大学生命与食品工程学院
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采用改进的氯化苄法对红曲霉DNA进行提取纯化,探讨了提取液中EDTA的浓度以及其他因素对提取结果的影响.同时,以该法提取的DNA为模板,采用正交实验优化RAPD分析最佳反应条件.结果表明,当提取液中EDTA浓度为125mmol/l时,所得的红曲霉DNA的质量和数量均较理想,每克红曲霉菌丝体(湿重)能提取到50μg的DNA,分子量约为25kb,以此DNA为模板进行PCR扩增,其最佳反应体系为:Mg2+2.0mmol/l,dNTPs 0.15mmol/l,Taq 0.05U/μl,模板DNA 1.2ng/μl
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