四川梅花鹿(CAG)n微卫星文库构建

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【摘要】

：

应用Dynal磁珠-生物素标记的微卫星探针与四川梅花鹿基因组酶切片段杂交,捕获200～750 bp含有微卫星序列的DNA片段,连接pMD18-T载体,再转化到感受态细胞JM109中以构建文库.通过

【作者】

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刘梦瑶杨承忠高依敏肖珍王淋波王洁清刘武华张修月

【机构】

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四川大学生命科学学院,四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室,成都610064江西桃红岭梅花鹿国家级自然保护区,江西彭泽,332700;江西省新干中学,江西吉安,331300;

【出处】

：

四川动物

【发表日期】

：

2012年5期

【关键词】

：

四川梅花鹿磁珠富集法微卫星

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应用Dynal磁珠-生物素标记的微卫星探针与四川梅花鹿基因组酶切片段杂交,捕获200～750 bp含有微卫星序列的DNA片段,连接pMD18-T载体,再转化到感受态细胞JM109中以构建文库.通过PCR方法从(CAG)n文库中筛选阳性克隆,从576个转化子中获得了234个阳性克隆,对其全部进行序列测定,其中73个含有微卫星序列.除获得的目的微卫星序列(CAG)n外,还观察到(AG)n、(AT)n的重复序列.本研究表明,经过优化的磁珠富集法能够稳定、高效地获得四川梅花鹿微卫星标记.

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