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目的
观察过表达细胞周期蛋白依赖性激酶2A(CDKN2A)基因对食管鳞癌细胞株TE-13增殖、迁移能力的影响。
方法采用脂质体转染法将已构建好的PcDNA3.1_CDNK2A及空载体质粒PcDNA3.1_neo分别转染人食管癌细胞TE-13,分为实验组(PcDNA3.1_CDNK2A_TE-13),阴性对照组(PcDNA3.1_neo-TE-13)及空白对照组(只添加转染试剂)。采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染前后CDKN2A mRNA表达水平;应用噻唑蓝(MTT)法检测转染后细胞的增殖能力;采用Transwell实验检测细胞的迁移能力。
结果实验组、阴性对照组及空白对照组CDNK2A mRNA相对表达水平分别为0.45±0.10、0.48±0.12及2.12±0.24,实验组显著高于阴性对照和空白对照组(F=200.500,P=0.000)。实验组、阴性对照组及空白对照组吸光度值分别为0.71±0.08、1.05±0.09和0.97±0.08,差异有统计学意义(F=27.220,P=0.000)。Tanswell结果显示实验组、阴性对照组及空白对照组穿过生物膜细胞分别为(156.8±23.1)、(166.9±28.4)和(162.1±30.3)个,差异无统计学意义(F=0.200,P=0.818)。
结论CDKN2A基因表达能够显著抑制食管癌细胞的增殖,但对其迁移能力无明显影响。