【摘 要】
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目的观察FBXL20（F-box and leucine rich repeat protein 20）对人非小细胞肺癌A549细胞生长的影响并初步探究其机制。方法采用慢病毒感染A549细胞,构建对照组（FBXL20-vector组）及
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院胸心外科;
【基金项目】
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重庆市卫生局重点科研项目(2012-0-015)~~
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目的观察FBXL20（F-box and leucine rich repeat protein 20）对人非小细胞肺癌A549细胞生长的影响并初步探究其机制。方法采用慢病毒感染A549细胞,构建对照组（FBXL20-vector组）及干扰组（FBXL20-RNAi组）,通过Western blot验证慢病毒敲减效率。利用CCK-8及集落形成实验观察FBXL20的下调对A549细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测细胞周期的变化,Western blot分析周期蛋白的改变,基因集富集分析（gene set enrichment analysis,GSEA）探究FBXL20可能参与的生物学过程。结果干扰组FBXL20的蛋白表达（0.36±0.02）显著低于对照组（0.58±0.01）（P<0.01）。与对照组相比,干扰组的增殖能力增强（P<0.05）,形成的集落数目也显著增加（100±20 vs 53±6）（P<0.05）,且停留在G2/M期的细胞比例明显降低（5.65±1.35 vs 9.94±1.44）（P<0.05）。Western blot结果显示Cyclin D1、ERK1/2蛋白表达无明显变化（P>0.05）,CDK2、Cyclin E、CDK1、Cyclin A、Cyclin B1蛋白表达显著增加,而p-ERK1/2则显著降低（P<0.05）。GSEA结果显示FBXL20的低表达与G2/M检查点呈正相关（P<0.01）。结论下调FBXL20可以加快A549细胞G2/M期的进程,提高其生长能力。其机制可能是通过抑制p-ERK的激活,使得其下游周期蛋白CDK1、Cyclin A、Cyclin B1表达增加而实现的。
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