【摘 要】
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目的 研究应用丁硫氨酸亚砜胺(BSO)降低谷胱甘肽(GSH)含量后,三氧化二砷(As2O3)对K562/ADM细胞的诱导凋亡效应,及其对多药耐药相关蛋白1(MRP1)的抑制作用.方法 As2O3组(0.5、2.0、5.0 μmol/L)单独及联合100 μmol/L BSO作用于K562/ADM细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测K562/ADM细胞的增殖活性;Annexin V/PI标记
【机 构】
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目的 研究应用丁硫氨酸亚砜胺(BSO)降低谷胱甘肽(GSH)含量后,三氧化二砷(As2O3)对K562/ADM细胞的诱导凋亡效应,及其对多药耐药相关蛋白1(MRP1)的抑制作用.方法 As2O3组(0.5、2.0、5.0 μmol/L)单独及联合100 μmol/L BSO作用于K562/ADM细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测K562/ADM细胞的增殖活性;Annexin V/PI标记法观察K562/ADM细胞的凋亡效应;分光光度法检测K562/ADM细胞内GSH含量变化;流式细胞术(FCM)检测的MRP1蛋白水平表达变化;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测MRP1的编码基因mRNA的表达变化.结果 降低GSH含量后,临床剂量As2O3(0.5、2.0 μmol/L)联合BSO 24 h内即可抑制K562/ADM细胞的增殖活性,诱导K562/ADM细胞发生凋亡,72 h单用As2O3(0.5、2.0 μmol/L)凋亡率为(8.32±2.11)％、(16.75±3.56)％,GSH含量降低后,两剂量组细胞的凋亡率分别为(82.15±9.28)％和(92.72±9.41)％.72 h后,临床剂量As2O3联合BSO抑制MRP1的荧光强度分别为8.20±0.92和10.40±2.33,明显低于单用高剂量As2O3组的荧光强度(21.30±3.09);两药联合对于MRP1 mRNA的作用效果也明显强于单用高剂量As2O3组.结论 GSH的含量变化与As2O3的作用效果密切相关,As2O3联合BSO可有效诱导K562/ADM细胞发生凋亡,可有效抑制MRP1及其编码基因mRNA的表达。
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