【摘 要】
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Nrf2是细胞抗氧化体系Keap1-Nrf2/ARE中的关键转录因子.本研究以杜长大仔猪肝脏总RNA为材料,根据GenBank公布的人、牛和大鼠Nrf2序列设计引物,利用RT-PCR法克隆猪Nrf2基因的
【机 构】
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河南牧业经济学院动物科技学院,郑州,450046;西北农林科技大学动物科技学院,杨凌,712100
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Nrf2是细胞抗氧化体系Keap1-Nrf2/ARE中的关键转录因子.本研究以杜长大仔猪肝脏总RNA为材料,根据GenBank公布的人、牛和大鼠Nrf2序列设计引物,利用RT-PCR法克隆猪Nrf2基因的全编码序列,并通过生物信息学分析预测该基因的结构和系统发育;采用qRT-PCR技术检测Nrf2基因在仔猪不同生理阶段和不同组织中的表达情况.结果 表明:猪Nrf2基因包含1个1 776 bp的开放阅读框,编码591个氨基酸.生物信息学分析显示,猪Nrf2蛋白含3个特征结构域,与牛Nrf2的氨基酸序列相似性最高,为88.45％,而与褶纹冠蚌相似度最低,为30.64％.qRT-PCR结果显示,Nrf2在本实验所检测的组织中均有表达,其中以背最长肌表达量最高,显著高于其他组织(p＜0.05);心脏和肾脏次之,小肠和肝脏表达较少;肺脏和脾脏表达丰度最低;Nrf2在初生、断奶、35日龄、70日龄和100日龄猪的背最长肌中均有表达,以断奶阶段表达量最高(p＜0.05),100日龄表达量最低(P＜0.05).本研究为进一步探讨猪Nrf2基因的生物学功能提供了理论依据.
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