目的 建立简便、特异的检测犬粪贾第虫抗原贾第素α-12的双抗夹心ELISA方法. 方法 利用辣根过氧化物酶标记抗贾第素α-12单克隆抗体4C9,通过过滤、超声的方法处理犬粪样品.以抗贾第素α-12单克隆抗体3H10为捕获抗体,5％脱脂奶粉作为封闭剂,辣根过氧化物酶标记的抗贾第素α-12单克隆抗体4C9为检测抗体,经底物显色后,用酶标仪测量490 nm处的吸光度(A)值.通过棋盘滴定法确定抗体最适包被浓度、最佳封闭剂、待检粪液最佳稀释度及酶标抗体最佳稀释度.应用建立的ELISA方法对122份犬粪样品进行检测. 结果 建立的双抗夹心ELISA检测标准阳性样品的A490为0.465,标准阴性样品的A490为0.098;优化的最佳检测条件为:抗体包被浓度为0.01 mg/ml,封闭剂为1％ BSA,粪液稀释度为1∶2,酶标二抗稀释度为1∶400,该试验与犬等孢球虫、犬隐孢子虫、犬蛔虫样品均无交叉反应,批间和批内变异系数较小,重复性好.应用本方法对122份犬粪进行检测,阳性率为36.9％. 结论 建立的双抗夹心ELISA方法特异性高,重复性好,为贾第虫流行病学调查提供了一种更简便、快速、特异的免疫学检测方法.