论文部分内容阅读
目的
建立耐奥沙利铂(L-OHP)的人结直肠癌耐药细胞株(HT-29/L-OHP)，检测相关耐药基因LAPTM4β的表达，探讨其在L-OHP耐药中的作用机制。
方法采用药物浓度梯度递增间歇诱导法建立人结直肠癌耐药株HT-29/L-OHP；应用LAPTM4β-35蛋白抑制剂作用于HT-29/L-OHP细胞株后，流式细胞技术检测细胞凋亡，比较其与HT-29/L-OHP细胞株对于L-OHP的耐药情况；应用RT-PCR检测LAPTM4β mRNA的表达；应用Western blot测定LAPTM4β-35蛋白的表达。
结果成功建立人结直肠癌耐药细胞株HT-29/L-OHP，流式细胞技术检测结果表明应用LAPTM4β-35蛋白抑制剂作用于HT-29/L-OHP细胞株后，其对于L-OHP的耐药明显低于HT-29/L-OHP细胞株。HT-29/L-OHP细胞株中LAPTM4β mRNA表达水平明显高于亲本细胞株HT-29，分别为5.613±0.139和1.105±0.187，(P<0.05)，LAPTM4β-35蛋白在HT-29/L-OHP细胞和HT-29细胞的相对表达量2.203±0.080和1.033±0.070，(P<0.05)。
结论LAPTM4β在结直肠癌耐药细胞株中过表达，与结直肠癌奥沙利铂耐药密切相关，可以作为结直肠癌耐药的一个敏感的生物学标志物。