【摘 要】
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利用生物信息学方法预测了 cry1C 蛋白的抗原表位区并命名为 Δcry1C。优化 Δcry1C 的核苷酸序列并进行人工合成,构建重组表达载体 p ET28b(+)-Δcry1C。在 E.coli 中诱导表达
【基金项目】
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国家转基因重大项目(2016ZX08001001-001-007);吉林省科技发展计划重点科技攻关项目(20160204033NY);吉林省农业科技创新工程项目(CXGC2017TD009)
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利用生物信息学方法预测了 cry1C 蛋白的抗原表位区并命名为 Δcry1C。优化 Δcry1C 的核苷酸序列并进行人工合成,构建重组表达载体 p ET28b(+)-Δcry1C。在 E.coli 中诱导表达 His6-Δcry1C 蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,分离纯化获得 cry1C多抗血清。ELISA 测定结果,抗体效价最高可达 1 :512 000。Western Blot 分析结果,cry1C 多克隆抗体能够与 cry1C 转基因抗虫水稻蛋白特异性结合。利用生物信息学筛选抗原表位区并优化序列、原核表达重组蛋白、免疫制备 cry1C 多克隆抗体,为深入研究抗鳞翅目害虫植物提供前提条件。
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