【摘 要】
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目前,L-瓜氨酸的主要生产方法为化学法水解L-精氨酸。利用精氨酸脱亚胺酶可以直接转化L-精氨酸获得L-瓜氨酸,条件温和、效率高、环境友好,因而在工业化生产中具有很好的应用
【机 构】
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石药集团中诺药业(石家庄)有限公司酶工程研究所
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目前,L-瓜氨酸的主要生产方法为化学法水解L-精氨酸。利用精氨酸脱亚胺酶可以直接转化L-精氨酸获得L-瓜氨酸,条件温和、效率高、环境友好,因而在工业化生产中具有很好的应用前景。本研究将优化后的单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)精氨酸脱亚胺酶(ADI)基因序列分别克隆到相应的载体pET-21a、pWB980及pAO815中,并分别转化大肠杆菌BL21(DE3)、枯草芽胞杆菌WB600及毕赤酵母GS115中构建表达菌株。发现大肠杆菌能高效表达ADI。经过5L发酵罐验证,发酵后酶活力单位可达200 000~270 000 U·L-1。经过验证,该酶可以很好地应用于L-瓜氨酸生产。在7 920~17 600U·L-1的ADI存在条件下,5.5h内,可使95%的浓度为94~258g·L-1的精氨酸转化为瓜氨酸。该方法具备良好的工业化应用前景。
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