琥珀酰辅酶A转移酶硝基化酪氨酸位点特异单克隆抗体的制备

来源 :湖南农业大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:muhaiyu
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线粒体琥珀酰辅酶A转移酶(SCOT)含有4个酪氨酸残基,其4、76位点酪氨酸(Tyr4、Tyr36)的硝基化可导致其酶活性下降,制备特定的抗体可对其硝基化水平和位点进行检测。应用淋巴细胞杂交瘤技术,以化学合成的禽琥珀酰辅酶A转移酶硝基化Tyr4和Tyr^76肽段为半抗原,偶联钥孔血蓝蛋白(KLH)后,作为免疫原免疫Balb/c小鼠,分离免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了多株融合细胞。经对融合细胞多次筛选和检测,最终获得4株单克隆抗体,分别对应SCOTTyr4和TVr^76硝基化后表位,其间接
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