【摘 要】
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分离培养仔猪关节软骨细胞,从中提取总RNA,采用RT-PCR法扩增出关节软骨细胞中胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)的cDNA,与pMD 18-T载体相连,转化JM109大肠埃希氏菌,提取质粒,经鉴
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分离培养仔猪关节软骨细胞,从中提取总RNA,采用RT-PCR法扩增出关节软骨细胞中胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)的cDNA,与pMD 18-T载体相连,转化JM109大肠埃希氏菌,提取质粒,经鉴定,所扩增的片段为目的片段.在此基础上培养仔猪关节软骨细胞,并在培养液中添加不同水平的铜,分别在第0、12、24、48 h收集软骨细胞,提取总RNA,采用RT-PCR法扩增出IGF-Ⅰ的cDNA,以β-actin为内参,用凝胶分析系统对扩增出的cDNA进行扫描分析,计算IGF-ⅠmRNA基因表达的相对水平.结果
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