西施舌基因组DNA的提取及其RAPD反应条件的优化

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通过实验比较获得了一种高效、简便的西施舌基因组DNA的提取方法,以该法提取的基因组DNA为模板,对西施舌RAPD分析中的DNA模板浓度、镁离子浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq酶浓度进行了研究,初步确定了适于西施舌RAPD分析的最佳反应体系:25μL反应体系中,含模板DNA 25 ng,10×PCR缓冲液2.5μL,dNTPs 0.3 mmol/L,MgCl22.5 mmol/L,引物15 ng,Taq DNA聚合酶1.5U。 An efficient and simple method for extracting Genomic DNA of Xishiganenx japonicus was obtained through experiments. Genomic DNA extracted from this genomic DNA was used as a template to analyze DNA template concentration, magnesium ion concentration, dNTPs concentration, primer concentration and Taq enzyme concentration was studied. The best reaction system suitable for RAPD analysis was identified: 25μL reaction system containing 25 ng of template DNA, 2.5 μL of 10 × PCR buffer, 0.3 mmol / L of dNTPs, mmol / L, primer 15 ng, Taq DNA polymerase 1.5U.
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