【摘 要】
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为制备抗非洲猪瘟病毒（ASFV）H240R蛋白单克隆抗体，首先构建原核表达质粒pET-29b-H240R,再进行蛋白表达与纯化，随后免疫Balb/c小鼠，通过杂交瘤细胞技术制备、间接ELISA方法筛选获得单克隆抗体。结果显示，共获得4株杂交瘤细胞株，腹水效价均高于1∶40 000;亚型鉴定结果显示，3株单克隆抗体（12D6、21G3、8G7）重链亚类为IgG2b, 13D2重链亚类为IgG1,轻链
【基金项目】
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国家自然科学基金专项项目（31941001）；
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为制备抗非洲猪瘟病毒（ASFV）H240R蛋白单克隆抗体，首先构建原核表达质粒pET-29b-H240R,再进行蛋白表达与纯化，随后免疫Balb/c小鼠，通过杂交瘤细胞技术制备、间接ELISA方法筛选获得单克隆抗体。结果显示，共获得4株杂交瘤细胞株，腹水效价均高于1∶40 000;亚型鉴定结果显示，3株单克隆抗体（12D6、21G3、8G7）重链亚类为IgG2b, 13D2重链亚类为IgG1,轻链亚类均为k。Western blot和Dot blot鉴定结果表明，21G3、13D2株单克隆抗体识别的抗原表位为线性表位，而12D6和8G7识别的是构象表位。间接免疫荧光试验（IFA）结果显示，4株单克隆抗体均能特异性识别HEK293T细胞中表达的H240R蛋白。制备了ASFV H240R蛋白单克隆抗体，为H240R蛋白的表位和功能研究奠定了基础。
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