慢病毒介导神经营养因子3基因修饰大鼠嗅鞘细胞的实验研究

来源 :神经解剖学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuthusboy
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探究神经营养因子3(NT-3)基因修饰的嗅鞘细胞(OECs)分泌的NT-3在体内外的活性.方法:取SD大鼠胎鼠嗅球组织,进行原代培养、纯化和鉴定,将纯化后的OECs分为对照组(control)、空病毒感染组(Lenti-NC)以及Lenti-NT-3感染组(Lenti-NT-3)3组,分别在4~28 d,每隔4d应用酶联免疫分析方法(ELISA)测细胞培养上清中NT-3的浓度.并将NT-3基因修饰的OECs(NT-3-OECs)注入SD大鼠脑部,2周后进行脑组织石蜡切片p75神经生长因子受体(p75 NGFR)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光检测,运用ELISA方法在4~16 d,每隔4d测各组大鼠脑组织中NT-3的浓度.结果:纯化后OECs纯度为(92.03±2.17)%;慢病毒对OECs的感染率为(70.69±10.29)%;各时间点Lenti-NT-3组上清中NT-3含量均显著高于Control组与Lenti-NC组(P<0.05);NT-3-OECs移植入大鼠脑内2周后,可见p75 NGFR、GFAP表达阳性的OECs;各时间点Lenti-NT-3组脑组织中NT-3含量均显著高于Control组与Lenti-NC组(P<0.05).结论:运用慢病毒载体构建的NT-3-OECs可在体内外高表达具有生物学活性的NT-3.
其他文献
目的:应用整合组学分析子代大鼠前额叶皮质(PFC)代谢组及磷酸蛋白质组的变化,研究产前应激(PS)导致子代大鼠抑郁样行为的分子机制.方法:SD雌性妊娠大鼠在孕期第14~20 d接受慢性束缚应激.采用糖水偏好实验(SPT)检测出生后30 d(P30)子代大鼠抑郁样行为.分别采用串联质谱标签(TMT)定量蛋白质组学结合磷酸肽富集法和UHPLC-Q-TOFMS非靶向代谢组学对子代大鼠PFC的磷酸化蛋白质组及代谢组进行检测.结果:与对照组相比,抑郁样子代大鼠前额叶皮质有8404个差异修饰肽段和34个差异代谢物的丰
目的:探讨脑内慢性炎症对大鼠黑质部位脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响以及是否具有选择性.方法:将脂多糖(LPS)单次注射入SD大鼠侧脑室,造成全脑慢性炎症帕金森病(PD)模型,在注射后的不同时间点分离出不同部位的脑组织并提取蛋白,通过Western Blot方法检测BDNF在黑质和皮层的表达.结果:LPS注射后1周时黑质中BDNF的蛋白表达显著低于对照组,2周和4周时无显著差异,从8周开始显著低于对照组并且一直持续到24周;而皮层中实验组BDNF的表达与对照组相比在2周、4周、12周和24周时显著
目的:观察慢性脑缺血(CCI)小鼠海马CA1区和视网膜小胶质细胞(MG)在不同时间点的变化.方法:3月龄C57BL/6J小鼠行改良型双侧颈总动脉结扎(2VO)建立CCI模型,甲苯胺蓝灌注验证模型.建模后7、14和28 d,分别取脑和视网膜进行形态学染色,观察海马CA1区和视网膜的病理改变,以及MG标志物Iba-1、M1型指标iNOS、M2型指标TREM2的表达变化.结果:甲苯胺蓝灌注结果显示,2VO术后各组较假手术组小鼠脑组织染色均变浅.HE染色显示,2VO术后7d海马CA1和视网膜出现细胞水肿,随缺血时
目的:探讨微小RNA-122 (miR-122)在小鼠急性缺血性脑卒中的影响及其作用机制.方法:80只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为4组,假手术组(sham)、大脑中动脉阻塞组(MCAO)、miR-122模拟物注射组(MACO+miR-122 mimics)和miR-122抑制物注射组(MACO+ miR-122 inhibitor).电凝法建立永久性局灶性小鼠MCAO模型,脑室注射miR-122模拟物、miR-122抑制物后采用Longa神经功能评分评估小鼠神经功能缺损程度;real time RT
鲜味觉是5种基本味觉之一,自然界中存在很多种不同性质的鲜味觉物质,它们可以通过特定受体和神经引发鲜味觉反应,激活大脑皮层特定脑区产生愉悦体验,但高浓度的鲜味觉物质也会诱发厌恶反应.鲜味觉与其他味觉之间可以产生协同或抑制作用,以改善食物风味.此外,内脏中的鲜味觉受体感受到的信息可以通过迷走神经引起机体产生多种反应,影响人类健康.
目的:分别于常氧环境和低压低氧环境下建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型,通过测定小鼠的神经病理损伤和外周免疫激活,评估低压低氧环境对EAE小鼠的病理影响和潜在机制.方法:C57BL/6J雌性小鼠皮下注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白33-35(MOG33-35),建立EAE模型,于常氧环境和低压低氧环境(模拟海拔4500 m)分别暴露32 d,通过测定小鼠体重、临床病理评分(CS)评估小鼠病理损伤,利用苏木精-伊红(HE)染色测定中枢神经系统(CNS)炎性浸润、腊克沙固蓝(LFB)染色评估白质脱髓鞘状
目的:采用磁共振氢谱观察交泰丸治疗2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝的临床疗效.方法:选取2009年10月至2010年3月华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的T2DM患者40例作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组20例,2组均给予西医基础治疗,观察组同时加用交泰丸口服治疗,比较2组患者治疗12周前后的一般情况、血糖水平、血脂水平、肝功能的改变,采用磁共振氢谱法比较2组肝脏脂肪含量的差异.结果:治疗前2组患者人口学资料及生化指标、肝脏三酰甘油(TG)含量差异均无统计学意义(均P<
目的:研究交泰丸中主要活性成分小檗碱(BBR)、肉桂酸(CA)及其配伍(BBR/CA)对软脂酸(PA)诱导的NIT-1胰岛B细胞内脂质沉积的影响.方法:将细胞在PA的培养基中培养24 h,建立高脂诱导的细胞内脂肪沉积模型.分为模型组、BBR组、CA组、BBR/CA组、二甲双胍(Met)组,分别给予相应药物干预,另设对照组.油红O染色法评估细胞内脂肪沉积情况;酶法检测细胞内三酰甘油(TG)含量;使用Western Blotting和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)及
目的 探讨不同保存温度、保存时间及反复冻融对血清丙型肝炎病毒(HCV)抗体检测的影响.方法 收集50份血清样本,以当天检测的HCV抗体结果作为基线水平,将检测后的血清均分成4份,分别置于常温、4℃、-20℃和-80℃保存1、3、5、7 d后再次检测HCV抗体水平.另收集61份血清样本,以当天检测的HCV抗体结果作为基线水平,将检测后的血清均分成2份,分别置于-20℃和-80℃保存,2 h后解冻并检测HCV抗体,测定完成后立即冻存2 h,反复冻融4次.结果 与基线水平比较,常温和4℃保存1、3、5、7 d的
糖尿病的患病人数逐年增加,不仅严重威胁人类健康,也给社会和家庭带来了沉重的经济负担.口服降糖药和胰岛素等治疗糖尿病的药物,能部分缓解胰岛素分泌缺陷和胰岛素抵抗等问题,但不良反应明显.中医药治疗糖尿病及其并发症历史悠久,应用前景广阔.其中,交泰丸治疗2型糖尿病(T2 DM)受到越来越多的关注.现对交泰丸治疗T2 DM的研究进展进行综述.