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采用双融合PCR(doublefusion PCR)的方法将鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)的强毒株的VP2片段替换为疫苗株的相应片段以获得重组的病毒粒子.首先将被替换片段两侧的片段从强毒株的载体上扩增下来,并将目的片段从疫苗株序列的载体上扩增下来.然后用融合PCR的方法将目的片段与其上游片段融合起来,回收产物并将其与下游片段融合起来,最终得到了替换后的新序列.双融合PCR提供了一种快速、精确和不受酶切位点限制的片段替换方法.