猪牙胚釉原蛋白成熟肽基因原核表达克隆的构建

来源 :中华口腔医学研究杂志(电子版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:cuileidan
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目的克隆猪釉原蛋白(pAm)成熟肽编码区基因片段,并构建含有该基因的重组原核表达质粒,为制备基因工程化的重组pAm奠定基础。方法从新生小猪牙胚组织中抽提总RNA,逆转录合成牙胚cDNA,通过PCR扩增pAm成熟肽编码序列(约540bp),所得目的基因插入表达载体质粒PGEX4T1,转化大肠杆菌DH5α。重组质粒PGEX4T1-pAm经双酶切和核苷酸序列分析鉴定。结果重组质粒PGEX4T1-pAm经双酶切和测序鉴定证实载体质粒PGEX4T1中插入的基因片段与pAm成熟肽基因序列完全相同。结论从发育期猪牙胚组
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