【摘 要】
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本研究以转Bar基因稻谷外源基因片断(Bar,CaMV35s)为检测对象,应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法建立稻谷中转Bar基因稻谷成分的定量检测方法。分别设计两对内参基因(SPS,RBE4)
【机 构】
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中国科学院亚热带农业生态研究所农业生态工程重点实验室,中国科学院研究生院
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本研究以转Bar基因稻谷外源基因片断(Bar,CaMV35s)为检测对象,应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法建立稻谷中转Bar基因稻谷成分的定量检测方法。分别设计两对内参基因(SPS,RBE4)引物和外源基因(Bar,CaMV35s)引物,应用RT-PCR法对混合稻谷中不同量转Bar基因稻谷(30%、20%、10%、5%、0.9%、0.5%)进行定量检测,检测结果分别为:1、SPS与Bar基因组34.22%、22.14%、11.36%、6.21%、0.74%、0.32%;2、RBE4与Bar基因组28.68%、17.26%、11.92%、6.24%、0.75%、0.35%;3、SPS与CaMV35s基因组32.23%、21.87%、11.15%、4.35%、0.7%、0.37%;4、RBE4与CaMV35s基因组32.35%、22.54%、8.62%、4.62%、0.71%、0.36%。综合分析得出SPS与CaMV35s基因组合对转Bar基因稻谷定量检测的结果较为准确,可见RT-PCR法可以作为定量检测稻谷中转Bar基因稻谷成分的可信方法之一,但其准确性随转Bar基因成分含量的降低而降低,且与所选择的内参基因和外源基因引物有关。
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