【摘 要】
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为了研究铜绿假单胞菌外膜蛋白F和I的重要表位,根据已公布的F和I基因序列设计2对特异性引物,以分离的水貂源铜绿假单胞菌ZHDL9基因组为模板,扩增重要的表位基因F190—342(F1)
【机 构】
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河南省动物疫病防控与营养免疫院士工作站,吉林大学动物医学学院,安阳工学院生物与食品工程学院,河南省孟津县动物卫生监督所
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划项目(2011AA10A210),国家自然科学基金青年基金项目(31802170),安阳工学院博士科研启动基金项目(BSJ2016013).
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为了研究铜绿假单胞菌外膜蛋白F和I的重要表位,根据已公布的F和I基因序列设计2对特异性引物,以分离的水貂源铜绿假单胞菌ZHDL9基因组为模板,扩增重要的表位基因F190—342(F1)和I21—83(I2),并对得到的2段基因序列进行生物信息学分析。结果表明,PCR扩增所得F1和I2两段基因序列高度保守,不存在核苷酸的插入和缺失;通过融合PCR技术将得到的F1基因和I2基因无缝连接,得到651bp的融合基因F1I2。将融合基因F1I2克隆至原核表达载体pET-28a,成功构建了融合表达质粒pET-28a-
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