南昌霉素高产菌株的链霉素抗性基因突变诱变筛选研究

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通过链霉素对南昌霉素(Nanchangmyein)产生菌NS-41-80菌株孢子的致死浓度测定基础上,采用诱变剂甲基磺酸乙酯(EMS)的不同诱变剂量对菌株孢子进行诱变处理,诱变处理的孢子涂布在含链霉素(10μg/mL)致死浓度的高氏平板上,获得了大量的链霉素抗性基因(str)突变株.然后从3,000株链霉素抗性基因(str)突变株中通过初筛获得比诱变出发菌株产素能力提高20%以上的菌株202株.再进一步通过摇瓶复筛,获得比出发菌株产素能力分别提高100%、200%和300%高产菌株为48株,7株和1株,分别为复筛菌和初筛菌株的23.76%和1.60%;3.46%和0.23%;0.5%和0.03%.将产素能力提高240%以上5个菌株连同出发菌株连续3批次进行摇瓶发酵结果,5个突变株的产素能力均比出发菌株的产素能力提高57%~96.4%,其中突变株80-5.3-165菌株摇瓶发酵单位达6,000μg/mL以上,3批次摇瓶平均发酵单位达5,855μg/mL.建立了南昌霉素高产菌株的链霉素抗性基因突变诱变快速高效的筛选方法.
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