突变微小毛霉天冬氨酸蛋白酶的纯化及性质研究

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本文利用定点突变技术改造微小毛霉凝乳酶,将突变体(E13D)在毕赤酵母中表达,并对其进行纯化及性质研究,此突变酶水解活性有明显降低。通过SDS—PAGE电泳鉴定纯化后酶的分子质量为46kDa。当pH5.0~7.0,温度为60℃时酶活力最高,且pH从8.0到5.0范围内,酶活力随着pH降低而逐渐升高。Fe^2+,Fe^3+,Cu^+和Zn^2+是酶的机制剂,同时凝乳活力受1.10-Phenantrolin和peps/atinA抑制。Ca^2+,Mn^2+和Mg^2+是酶的激活剂,对酶活力有一定的催化作用。利
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