雄激素受体反义RNA逆转录病毒载体的构建及其鉴定

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lee419444083

【摘要】

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目的构建雄激素受体（AR）反义RNA逆转录病毒载体pL-AR-SN并进行包装和鉴定。方法PCR扩增ARcDNA片段并将之反向插入到逆转录病毒载体pLXSN，用脂质体法转染PA317细胞，提取转染细胞基

【作者】

：

王洛夫江军方玉华靳风烁靳文生

【机构】

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第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所泌尿外科

【出处】

：

第三军医大学学报

【发表日期】

：

2001年6期

【关键词】

：

雄激素受体反义RNA 逆转录病毒载体 pL-AR-SN 前列腺癌 androgen receptor antisense RNA retroviral vec

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目的构建雄激素受体（AR）反义RNA逆转录病毒载体pL-AR-SN并进行包装和鉴定。方法PCR扩增ARcDNA片段并将之反向插入到逆转录病毒载体pLXSN，用脂质体法转染PA317细胞，提取转染细胞基因组DNA和培养上清中重组逆转录病毒RNA，用PCR和RT-PCR法进行鉴定，NIH3T3细胞测定病毒滴度。结果限制性内切酶分析证明pL-AR-SN含有反向插入的ARcDNA目的片段；培养上清中病毒滴度为2.34×105CFU/ml，PCR和RT-PCR分别从转染细胞基因组DNA和培养上清中的重组逆

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