【摘 要】
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为探究细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶8基因(CDK8)在马鹿(Cervus elaphus)鹿茸的皮、间充质、前软骨和软骨组织中的mRNA表达水平和该基因编码蛋白的生物学特性,采用PCR方法克隆马鹿细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶8基因编码区(CDs)全长序列,并连入pMD-18T载体,测得核苷酸序列,进行相似性比对和系统进化树构建;利用生物信息学方法分析CDK8蛋白的组成、结构和理化性质;利用实时荧光定量
【机 构】
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东北林业大学野生动物与自然保护地学院
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(31671283); 中央高校基本科研业务费专项资金项目(2572019BE01);
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为探究细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶8基因(CDK8)在马鹿(Cervus elaphus)鹿茸的皮、间充质、前软骨和软骨组织中的mRNA表达水平和该基因编码蛋白的生物学特性,采用PCR方法克隆马鹿细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶8基因编码区(CDs)全长序列,并连入pMD-18T载体,测得核苷酸序列,进行相似性比对和系统进化树构建;利用生物信息学方法分析CDK8蛋白的组成、结构和理化性质;利用实时荧光定量PCR技术检测CDK8基因mRNA在鹿茸组织中的表达水平。结果表明:马鹿CDK8的编码区全长1 254 bp,共编码417个氨基酸;所编码的蛋白相对分子质量为47 744.11,理论等电点(pI)为7.28,是一种无信号肽、定位于细胞核的亲水性不稳定蛋白,共38个磷酸化位点,蛋白的二级结构以无规则蜷曲和α螺旋为主。CDK8的mRNA在茸皮组织中表达量最高,其后依次是间充质、软骨和前软骨。CDK8是转录机器中介体复合物的重要组成部分,研究克隆获得马鹿CDK8的CDs全长序列,可为了解鹿茸再生过程中CDK8的作用机制与功能提供重要的基础数据。
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