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【摘要】目的调查和分析医院RhD阴性患者的血清学表现型和不规则抗体筛查的情况。方法采用盐水试管法检测RhD抗原，微柱凝胶法检测Rh-CcEe抗原和不规则抗体。结果共检出RhD阴性176例(占037%)，其中检出不规则抗体5例(占284%)。表现型主要以ccdee和Ccdee为主。结论非紧急情况下，医院应对RhD阴性患者进行血清学表现型和不规则抗体筛查，尽量选择Rh血型相同的血液输注同时血站应建立一个稳定而具有详细资料的Rh阴性献血者库，以解决血液供需矛盾，及时满足临床用血需求。【关键词】Rh-D阴性血清学表现型不规则抗体
Analysis for the situation of the serological phenotype and irregular antibody on the patients with RhD(-)WANG Hua，ZHANG Hong-wei, TAN Fang, LI Dai-yu.The Affiliated Hospital of Luzhou Medical College，Luzhou 646000，China【Abstract】ObjectiveTo investigate and analysis the situation of the serological phenotype and irregular antibody on patients with RhD(-)(Rh blood group D-negative).MethodsUsing saline-vitro method to detect RhD antigen, and microcolumn gel test to detect Rh-CcEe antigen and to screen irregular antibodies.Results176 cases (accounting for 037%) with RhD(-) were detected, including 5 cases of irregular antibodies positive(accounting for 284%). Most of their phenotype were ccdee and Ccdee.ConclusionAt the non-emergency situations, the serological phenotype and irregular antibody should be tested for all patients with RhD(-) in hospital and the blood was choosed to transfuse to patients with tauto- RhD as far as possible. The database of RhD(-) donors with detailed information should be established for clinical transfusion in blood bank.【Key words】RhD(-);Phenotype;Irregular antibody人类Rh血型系统是临床上最重要的血型系统之一，也是最复杂的血型系统之一，其重要性仅次于ABO血型系统。RhD血型不合的输血及母子RhD血型不合的妊娠，可能产生危及生命的溶血性输血反应和新生儿溶血病［1］。RhD阴性患者的输血，也可由于Rh血型系统其余抗原不全相同而刺激机体产生免疫性抗体，从而引起输血反应。为此，笔者采用微柱凝胶技术对Rh(D)阴性患者进行血清学分型和不规则抗体筛查，现报告如下。1资料与方法
11一般资料泸医附院2006年5月~2010年4月门诊和住院用于检测血型的血液标本共计47 040例。
12试剂和仪器Rh(D)血型鉴定血清（IgM型）由上海血液生物医药有限公司提供微柱凝胶卡、筛查谱细胞、专用离心机、37 ℃温育器均由瑞士达亚美(DiaMed)公司提供。
13方法RhD采用盐水试管法检测。RhCcDEe分型、不规则抗体均采用微柱凝胶法检测，操作方法及判读标准均按试剂盒说明书进行。抗体筛查阳性血清用盐水介质和非盐水介质方法鉴定抗体性质（IgG或IgM）。2结果泸医附院门诊和住院用于检测血型的血液标本共计47 040例，共检出Rh(D)阴性176例，占037%。其中检出不规则抗体5例(均为IgG-抗体)，占Rh(D)阴性人群284%。Rh(D)阴性患者血型分布情况见表1。
表1Rh阴性患者血型分布情况表n（%）表型ABOAB合计ccdee302639499（562）Ccdee131418348（273）CCdee436215（85）ccdEe31307（40）CcdEe40004（23）CcdEE10102（11）ccdEE10001（06）合计56（318）44（250）67（381）9（51）176（100）3讨论Rh血型系统是最复杂的遗传多态性血型系统之一，也是最具临床意义的血型系统之一，抗原种数约有45种之多，主要抗原有D、C、E、c和e 5种抗原，由于D抗原的抗原性最强，具有高免疫性而最具临床意义，因此根据红细胞上D抗原的有无，将其分为Rh阳性或Rh阴性，其它抗原强弱依次为E>C>c>e的次序，均显示剂量效应［2］。Rh(D)血型在不同人种中的分布比例是有差异的，Rh阴性在我国汉族和蒙古族中属稀有血型。从47 040例检测标本中，共检出Rh(D)阴性176例（占037%），其中A型56例（占318%），B型44例（占250%），0型67例（占381%），AB型9例（占51%），Rh(D)阴性者ABO血型分布情况是O型的比例最高，其他依次为A>B>AB。Rh(D)阴性的检出率为037%，与中国汉族人群02%~05%基本相符。而从Rh(D)阴性患者的血清学表型来看，各表现型分布依次为ccdee>Ccdee>CCdee>ccdEe>CcdEe>CcdEE>ccdEE，以ccdee多见，Ccdee次之，分别占562%和273%，其他表现型比例较低。“天然”产生的Rh抗体极为少见，几乎所有的Rh抗体都是由于输入Rh血型不合的血液或胎母Rh血型不合的妊娠等同种免疫而产生［3］。为了了解Rh阴性患者体内抗体的存在情况，我们对所有Rh阴性患者进行不规则抗体筛选，在176例Rh(D)阴性患者中共检出不规则抗体5例，约占284%，其中2例由妊娠引起(均为IgG抗-D抗体)，3例由输血引起（2例抗-E，1例抗-c），可见Rh阴性患者不规则抗体的检出率还是比较高的。随着Rh血型系统分子生物学研究的不断深入，已有Rh表型基因分型技术，但与之相比，血清学Rh分型操作简便快速，不需要昂贵的仪器和设备，目前仍然在免疫血液学检查中发挥重要的作用［4］。目前，有条件的医院对Rh血型系统已常规进行D抗原检测，对D抗原阴性的患者，一般输注Rh(D)阴性血，但对Rh血型系统的其他抗原未做要求，这使得除D抗原之外，Rh血型系统其他抗原不合的输血可能性较大，根据176例Rh分型结果，e、c抗原比例较高，分别为920%及608%。提示对于e、c抗原阴性的患者应输注Rh血型相同的血液，否则产生e、c抗体的频率很高，影响再次输血。临床上尤其血液病、肿瘤等需反复输血的患者以及孕妇等，由除D之外的Rh血型抗原不合输血刺激而产生不规则抗体的可能性更大，对已经产生了抗体的患者或孕妇来说，再次Rh血型不相容输血或妊娠可引起严重的新生儿或胎儿免疫性溶血，造成新生儿溶血病或胎儿早产或者死亡［5］，因此必须鉴定抗体性质和种类，并选择不含相对抗原的血液输注，以避免输血反应的发生，而这会严重耽误紧急特殊情况下患者的用血，危及患者生命。因此医院应对Rh阴性患者进行表现型分型和抗体筛查，并将结果反馈给血站，促进血站开展Rh阴性献血者血清学表型和不规则抗体筛选的调查分析，并建立一个稳定而详细的Rh阴性献血者资料库，必要时对Rh(D)阴性稀有血型采用低温冰冻保存，使患者在非紧急情况下能尽量输注Rh同型血，减少不规则抗体的产生，为患者以后紧急情况下的用血预留时间。我国Rh阴性血源稀少，随着各医院Rh血型检测的普遍开展，人们对Rh血型抗原系统的认识也越来越深入，Rh(D)阴性血液的需求量会不断增多。国外已经把ABO和Rh分型等作为常规项目检测，为配血自动化打下了基础，这必将使临床输血的配合水平不断提高，从而保证输血疗效，减少免疫性输血反应的发生，提高临床用血的及时性、安全性和有效性，促进输血事业的发展。参 考 文 献
［1］ AVENT N D,REID M E.The Rh blood group sys-tem: a review.Blood,2000,95:375-387.
［2］ 高峰.临床输血与检验.北京：人民卫生出版社，2007:70-72.
［3］ 刘凤华,王小玲,崔岩.Rh阴性血型筛查及临床意义.内蒙古医学院学报,2004，26(1)：45-46.
［4］ 陈荣仓，陈筱华，林碧,等.Rh(D)阴性献血者的表型和不规则抗体筛选结果分析.临床血液学杂志,2009，22（8）：429-430.
［5］ 杨世明,潘晓莉,催颖.Rh(D)抗原及Rh血型免疫性抗体检测分析.细胞与分子免疫学杂志,2004,20(2):封3.
（收稿日期：2010-09-20）
（本文编辑：郎威）
Analysis for the situation of the serological phenotype and irregular antibody on the patients with RhD(-)WANG Hua，ZHANG Hong-wei, TAN Fang, LI Dai-yu.The Affiliated Hospital of Luzhou Medical College，Luzhou 646000，China【Abstract】ObjectiveTo investigate and analysis the situation of the serological phenotype and irregular antibody on patients with RhD(-)(Rh blood group D-negative).MethodsUsing saline-vitro method to detect RhD antigen, and microcolumn gel test to detect Rh-CcEe antigen and to screen irregular antibodies.Results176 cases (accounting for 037%) with RhD(-) were detected, including 5 cases of irregular antibodies positive(accounting for 284%). Most of their phenotype were ccdee and Ccdee.ConclusionAt the non-emergency situations, the serological phenotype and irregular antibody should be tested for all patients with RhD(-) in hospital and the blood was choosed to transfuse to patients with tauto- RhD as far as possible. The database of RhD(-) donors with detailed information should be established for clinical transfusion in blood bank.【Key words】RhD(-);Phenotype;Irregular antibody人类Rh血型系统是临床上最重要的血型系统之一，也是最复杂的血型系统之一，其重要性仅次于ABO血型系统。RhD血型不合的输血及母子RhD血型不合的妊娠，可能产生危及生命的溶血性输血反应和新生儿溶血病［1］。RhD阴性患者的输血，也可由于Rh血型系统其余抗原不全相同而刺激机体产生免疫性抗体，从而引起输血反应。为此，笔者采用微柱凝胶技术对Rh(D)阴性患者进行血清学分型和不规则抗体筛查，现报告如下。1资料与方法
11一般资料泸医附院2006年5月~2010年4月门诊和住院用于检测血型的血液标本共计47 040例。
12试剂和仪器Rh(D)血型鉴定血清（IgM型）由上海血液生物医药有限公司提供微柱凝胶卡、筛查谱细胞、专用离心机、37 ℃温育器均由瑞士达亚美(DiaMed)公司提供。
13方法RhD采用盐水试管法检测。RhCcDEe分型、不规则抗体均采用微柱凝胶法检测，操作方法及判读标准均按试剂盒说明书进行。抗体筛查阳性血清用盐水介质和非盐水介质方法鉴定抗体性质（IgG或IgM）。2结果泸医附院门诊和住院用于检测血型的血液标本共计47 040例，共检出Rh(D)阴性176例，占037%。其中检出不规则抗体5例(均为IgG-抗体)，占Rh(D)阴性人群284%。Rh(D)阴性患者血型分布情况见表1。
表1Rh阴性患者血型分布情况表n（%）表型ABOAB合计ccdee302639499（562）Ccdee131418348（273）CCdee436215（85）ccdEe31307（40）CcdEe40004（23）CcdEE10102（11）ccdEE10001（06）合计56（318）44（250）67（381）9（51）176（100）3讨论Rh血型系统是最复杂的遗传多态性血型系统之一，也是最具临床意义的血型系统之一，抗原种数约有45种之多，主要抗原有D、C、E、c和e 5种抗原，由于D抗原的抗原性最强，具有高免疫性而最具临床意义，因此根据红细胞上D抗原的有无，将其分为Rh阳性或Rh阴性，其它抗原强弱依次为E>C>c>e的次序，均显示剂量效应［2］。Rh(D)血型在不同人种中的分布比例是有差异的，Rh阴性在我国汉族和蒙古族中属稀有血型。从47 040例检测标本中，共检出Rh(D)阴性176例（占037%），其中A型56例（占318%），B型44例（占250%），0型67例（占381%），AB型9例（占51%），Rh(D)阴性者ABO血型分布情况是O型的比例最高，其他依次为A>B>AB。Rh(D)阴性的检出率为037%，与中国汉族人群02%~05%基本相符。而从Rh(D)阴性患者的血清学表型来看，各表现型分布依次为ccdee>Ccdee>CCdee>ccdEe>CcdEe>CcdEE>ccdEE，以ccdee多见，Ccdee次之，分别占562%和273%，其他表现型比例较低。“天然”产生的Rh抗体极为少见，几乎所有的Rh抗体都是由于输入Rh血型不合的血液或胎母Rh血型不合的妊娠等同种免疫而产生［3］。为了了解Rh阴性患者体内抗体的存在情况，我们对所有Rh阴性患者进行不规则抗体筛选，在176例Rh(D)阴性患者中共检出不规则抗体5例，约占284%，其中2例由妊娠引起(均为IgG抗-D抗体)，3例由输血引起（2例抗-E，1例抗-c），可见Rh阴性患者不规则抗体的检出率还是比较高的。随着Rh血型系统分子生物学研究的不断深入，已有Rh表型基因分型技术，但与之相比，血清学Rh分型操作简便快速，不需要昂贵的仪器和设备，目前仍然在免疫血液学检查中发挥重要的作用［4］。目前，有条件的医院对Rh血型系统已常规进行D抗原检测，对D抗原阴性的患者，一般输注Rh(D)阴性血，但对Rh血型系统的其他抗原未做要求，这使得除D抗原之外，Rh血型系统其他抗原不合的输血可能性较大，根据176例Rh分型结果，e、c抗原比例较高，分别为920%及608%。提示对于e、c抗原阴性的患者应输注Rh血型相同的血液，否则产生e、c抗体的频率很高，影响再次输血。临床上尤其血液病、肿瘤等需反复输血的患者以及孕妇等，由除D之外的Rh血型抗原不合输血刺激而产生不规则抗体的可能性更大，对已经产生了抗体的患者或孕妇来说，再次Rh血型不相容输血或妊娠可引起严重的新生儿或胎儿免疫性溶血，造成新生儿溶血病或胎儿早产或者死亡［5］，因此必须鉴定抗体性质和种类，并选择不含相对抗原的血液输注，以避免输血反应的发生，而这会严重耽误紧急特殊情况下患者的用血，危及患者生命。因此医院应对Rh阴性患者进行表现型分型和抗体筛查，并将结果反馈给血站，促进血站开展Rh阴性献血者血清学表型和不规则抗体筛选的调查分析，并建立一个稳定而详细的Rh阴性献血者资料库，必要时对Rh(D)阴性稀有血型采用低温冰冻保存，使患者在非紧急情况下能尽量输注Rh同型血，减少不规则抗体的产生，为患者以后紧急情况下的用血预留时间。我国Rh阴性血源稀少，随着各医院Rh血型检测的普遍开展，人们对Rh血型抗原系统的认识也越来越深入，Rh(D)阴性血液的需求量会不断增多。国外已经把ABO和Rh分型等作为常规项目检测，为配血自动化打下了基础，这必将使临床输血的配合水平不断提高，从而保证输血疗效，减少免疫性输血反应的发生，提高临床用血的及时性、安全性和有效性，促进输血事业的发展。参 考 文 献
［1］ AVENT N D,REID M E.The Rh blood group sys-tem: a review.Blood,2000,95:375-387.
［2］ 高峰.临床输血与检验.北京：人民卫生出版社，2007:70-72.
［3］ 刘凤华,王小玲,崔岩.Rh阴性血型筛查及临床意义.内蒙古医学院学报,2004，26(1)：45-46.
［4］ 陈荣仓，陈筱华，林碧,等.Rh(D)阴性献血者的表型和不规则抗体筛选结果分析.临床血液学杂志,2009，22（8）：429-430.
［5］ 杨世明,潘晓莉,催颖.Rh(D)抗原及Rh血型免疫性抗体检测分析.细胞与分子免疫学杂志,2004,20(2):封3.
（收稿日期：2010-09-20）
（本文编辑：郎威）