表达microRNA-203 tough decoy的慢病毒载体构建及应用

来源 :天津医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lcyR87777

【摘要】

：

目的建立表达microRNA（miRNA）tough decoy（TuD）的慢病毒载体构建方法，并检测其对细胞内miRNA表达水平及细胞表型的影响。方法在慢病毒表达质粒pSIHl-H1-copGFP中通过两步克隆，首先

【作者】

：

刘涛王玉亮宋红丽付楠楠吴本娟沈中阳

【机构】

：

天津市第一中心医院卫生部危重病急救医学重点实验室邮编,器官移植中心,天津医科大学一中心临床学院

【出处】

：

天津医药

【发表日期】

：

2014年10期

【关键词】

：

间质干细胞慢病毒属遗传载体质粒细胞凋亡微RNAs 细胞活性 miRNA-203 tough decoy

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目(81270528);中国博士后科学基金资助项目(2013M541185);天津市应用基础与前沿技术研究计划资助项目(08JCYBJC08400、12JCZDJC25200、11JCZDJC27800)

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目的建立表达microRNA（miRNA）tough decoy（TuD）的慢病毒载体构建方法，并检测其对细胞内miRNA表达水平及细胞表型的影响。方法在慢病毒表达质粒pSIHl-H1-copGFP中通过两步克隆，首先构建miRNA TuD通用骨架质粒，进一步构建特异性针对大鼠miR-203的TuD表达载体。在293T细胞中包装成慢病毒后，感染大鼠骨髓间充质干细胞（BM-MSCs），同时用pSIHl-H1-copGFP空质粒包装慢病毒，感染BM-MSCs作为对照。定量RT-PCR检测细胞中miR-203的

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