【摘 要】
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目的:研究健脾解毒方含药血清对人大肠癌SW48细胞增殖的影响及作用机制.方法:采用水提法制作健脾解毒方粗提取物,超高效液相-高分辨飞行时间质谱法分析健脾解毒方粗提取物的
【机 构】
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中南大学湘雅二医院中西医结合科,长沙,410011中南大学湘雅二医院普外科,长沙,410011;中南大学湘雅二医院肿瘤科,长沙,410011;湖南中医药大学药学院,长沙,410028;中南大学湘雅二医
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目的:研究健脾解毒方含药血清对人大肠癌SW48细胞增殖的影响及作用机制.方法:采用水提法制作健脾解毒方粗提取物,超高效液相-高分辨飞行时间质谱法分析健脾解毒方粗提取物的主要活性成分,利用血清药理学方法制备低、中、高浓度健脾解毒方含药血清,MTT法检测人结肠癌SW48细胞增殖活性,运用流式细胞术检测细胞周期,RT-PCR技术检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR) mRN表达,Western印迹技术检测磷酸化(phospho,P)-mTOR,P-P53和P21的蛋白表达.结果:通过高分辨质谱结合对照品数据相关分析,对健脾解毒方粗提取物中7个主要成分(毛蕊异黄酮苷、黄芪甲苷、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、甘草酸、芹菜素、白术内酯Ⅱ)进行了鉴定及分析;健脾解毒方中、高剂量含药血清对SW48细胞有明显抑制增殖作用;健脾解毒方中、高剂量含药血清使SW48细胞周期阻滞在G1期;健脾解毒方含药血清能够下调的mTOR mRN及P-mTOR蛋白表达,上调P-P53和P21蛋白的表达.结论:健脾解毒方可能通过mTOR-P53-P21途径抑制人结肠癌SW48细胞的增殖,这可能是健脾解毒方治疗结肠癌的作用机制之一.
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