重组人Flt3配体在大肠杆菌中的高效表达和生物学活性的鉴定

来源 :现代免疫学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：iceagebirdxq

【摘要】

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根据天然的人Flt3配体(Flt3 ligand,FL)基因和遵循适合大肠杆菌BL21(DE3)表达体系表达条件及不改变FL天然蛋白氨基酸序列的原则,对其进行改造,所获得的FL功能片段(FL134)克隆

【作者】

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郁建锋李大为马弘冰吴明媛周璇李敏张学

【机构】

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苏州大学生物技术研究所,苏州大学生物技术研究所

【出处】

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现代免疫学

【发表日期】

：

2005年2期

【关键词】

：

FLT3配体包涵体 rhFL134 Flt3 (fms-like tyrosine kinase 3) ligand rhFL134 inclusion bo

【基金项目】

：

国防科工委预研项目，江苏省重点实验室基金

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根据天然的人Flt3配体(Flt3 ligand,FL)基因和遵循适合大肠杆菌BL21(DE3)表达体系表达条件及不改变FL天然蛋白氨基酸序列的原则,对其进行改造,所获得的FL功能片段(FL134)克隆入PET30a表达载体,在C端融合了6个His,继而在大肠杆菌中诱导表达.结果表明重组蛋白rhFL134以包涵体形式在大肠杆菌(BL21)中可得到较高水平的表达.通过蛋白的变性、复性和HiTrapTM亲和层析获得了纯度达92%以上的rhFL134重组蛋白.体外的活性实验显示,重组蛋白rhFL134具有显著的

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