富含半胱氨酸蛋白61对人肾小管上皮细胞增殖与细胞周期的影响

来源 :中华肾脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:minister635298
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目的 观察富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)蛋白对人肾小管上皮细胞(HK-2)增殖与细胞周期的影响.方法 细胞被分为空白对照、阴性对照和Cyr61转染组.克隆Cyr61cDNA,构建pEGFP-N2-Cyr61重组质粒,利用脂质体分别将重组质粒与pEGFP-N2空质粒瞬时转染HK-2.四唑盐比色实验(MTT)检测细胞增殖;流式细胞分析术检测转染效率和细胞凋亡率;Western印迹法检测Cyr61蛋白、磷酸化黏着斑激酶(p-FAK)、细胞周期蛋白依赖性激酶2 (CDK2)的表达.结果 pEGFP-N2-Cyr61重组质粒可高效转染HK-2缅胞.与空白对照、阴性对照组相比,Cyr61转染组细胞和培养液中的Cyr61蛋白表达量显著提高,细胞增殖活力明显增强,细胞中G1时相的比例显著减少,S时相显著增加,细胞凋亡率下降(均P<0.01).Cyr61转染组细胞中p-FAK、CDK2表达量亦显著提高(P<0.01).结论 高表达的Cyr61蛋白可通过FAK途径促进CDK2表达,从而促进HK-2细胞进入S期,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡。

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