【摘 要】
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目的 探讨过氧化氢(H2O2)对人晶状体上皮细胞的细胞质膜微囊蛋白(CP)及磷酸化CP-1分布与表达的影响.方法 给予人晶状体上皮细胞(SRA01/04)不同浓度及不同时间点的H2O2刺激.用
【机 构】
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浙江大学医学院附属第二医院眼科中心,浙江大学医学院浙江省生物电磁学重点研究实验室
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目的 探讨过氧化氢(H2O2)对人晶状体上皮细胞的细胞质膜微囊蛋白(CP)及磷酸化CP-1分布与表达的影响.方法 给予人晶状体上皮细胞(SRA01/04)不同浓度及不同时间点的H2O2刺激.用激光共聚焦显微镜和免疫荧光显微镜观察CP及磷酸化CP-1的分布.通过免疫印迹试验观察CP表达水平的变化以及磷酸化CP-1的表达.结果 通过激光共聚焦显微镜和荧光显微镜,观察到人晶状体上皮细胞的质膜和细胞质内含有丰富的CP;当给予细胞H2O2刺激后,细胞质内CP的分布增多;当刺激时间达到1 h,细胞膜被破坏,但仍可观察到CP的分布情况.此外,H2O2的刺激可以使CP-1发生磷酸化.免疫印迹试验发现,随着H2O2作用时间的延长和刺激浓度的升高,细胞质膜和细胞总蛋白质的CP表达水平呈下调趋势.结论 H2O2刺激人晶状体上皮细胞后,CP重新分布并可能破坏了细胞质膜微囊(caveolae)的结构,使得细胞的CP表达下调.细胞质膜微囊和CP可能在人晶状体上皮细胞中具有重要作用.
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