目的建立牛黄中共价胆红素、结合胆红素和游离胆红素的专属分析方法,深入比较各胆红素在天然牛黄和体外培育牛黄中的含量和比例,为后续含牛黄类制剂中牛黄鉴定提供依据。方法样品采用二氯甲烷作为基本提取溶剂,辅助加入不同螯合剂来进行各类胆红素的提取,并采用间接计算法得到牛黄中3种胆红素的量。具体采用HPLC法,迪马Diamonsil C₁₈（4.6 mm×150 mm,5μm）色谱柱;流动相为乙腈-1%冰醋酸溶液（95∶5）;检测波长为450 nm。结果游离胆红素在天然牛黄中均有检出但含量较低、在体外培育牛黄中除个别样品外均未检出;天然牛黄中总胆红素含量差异较大,而体外培育牛黄中总胆红素含量较为接近;从共价胆红素和结合胆红素占总胆红素的比例来看,天然牛黄中共价胆红素比例一般较高,体外培育牛黄则以结合胆红素为主。结论天然牛黄和体外培育牛黄中不同类型胆红素的含量及比例不同,具较强专属性,为识别含牛黄制剂中牛黄种类及如何评价牛黄质量提供了新的思路。