阴沟肠杆菌铁氢酶（hydA）基因在大肠杆菌中的表达及其产氢特性

来源 :太阳能学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yangjianwu2008

【摘要】

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合成Enterobacter cloacae IIT-BT08的铁氢酶（hydA）基因片段，PCR扩增出全长ORF。将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-2，构建了表达质粒pGEX-4T-2-hydA，转化大肠杆菌BL21（DE3）并在

【作者】

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赵锦芳程军戚峰张传溪

【机构】

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浙江大学昆虫科学研究所分子生物学实验室,浙江大学能源清洁利用国家重点实验室

【出处】

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太阳能学报

【发表日期】

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2009年6期

【关键词】

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氢气阴沟肠杆菌铁氢酶原核表达发酵 Enterobacter cloacae IIT-BT 08 hydA prokaryotic expressio

【基金项目】

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基金项目：国家高技术研究发展计划（863）项目（2006AA052122）,国家自然科学基金（50406022）,全国优秀博士学位论文作者专项资金（200437）

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合成Enterobacter cloacae IIT-BT08的铁氢酶（hydA）基因片段，PCR扩增出全长ORF。将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-2，构建了表达质粒pGEX-4T-2-hydA，转化大肠杆菌BL21（DE3）并在哪诱导下表达。SDS-PAGE分析表明在约42kDa处有特异性条带。用抗GST多克隆抗体对GST-hydA融合蛋白进行了Westernblot检测，进一步证明了hydA得到了正确的融合表达。产氢活性检测结果表明表达的重组hydA在大肠杆菌中具有明显的产氢活性。测定了培

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