【摘 要】
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目的 探讨激酶插入区受体（KDR）调节磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路对宫颈癌增殖、迁移和侵袭的影响。方法 通过实时荧光定量PCR实验和免疫组织化学染色测定人宫颈癌组织和其癌旁组织中KDR的表达。体外培养HeLa细胞，随机分为对照组、KDR siRNA组、KDR siRNA阴性对照组、KDR siRNA+740 Y-P（PI3K激活剂
【基金项目】
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遵义市联合基金项目：遵市科合HZ字（2019）88号；
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目的 探讨激酶插入区受体（KDR）调节磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路对宫颈癌增殖、迁移和侵袭的影响。方法 通过实时荧光定量PCR实验和免疫组织化学染色测定人宫颈癌组织和其癌旁组织中KDR的表达。体外培养HeLa细胞，随机分为对照组、KDR siRNA组、KDR siRNA阴性对照组、KDR siRNA+740 Y-P（PI3K激活剂）组，分组转染后，通过MTT实验、平板集落形成实验检测各组HeLa细胞增殖；通过Hoechst 33258染色检测各组HeLa细胞凋亡；通过划痕实验、Transwell实验分别检测各组HeLa细胞迁移及侵袭；通过免疫荧光染色检测各组HeLa细胞Bax、Bcl-2表达；通过免疫印迹实验检测各组HeLa细胞上皮间充质转化相关蛋白（Claudin-1、ZO-1、Vimentin、E-cadherin）、KDR蛋白及PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白（p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR）表达。结果 与癌旁组织相比，宫颈癌组织中KDR mRNA表达和KDR阳性表达率明显升高（P＜0.05）。与对照组相比，KDRsiRNA组细胞增殖率、集落生成率、迁移距离、侵袭数、Claudin-1、Vimentin与KDR蛋白表达、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR降低（P＜0.05），凋亡率、Bax/Bcl-2、ZO-1及E-cadherin蛋白表达升高（P＜0.05）;KDR siRNA阴性对照组细胞各指标无显著差异（P＞0.05）。740 Y-P可逆转KDR siRNA对细胞各指标的作用。结论 敲低KDR可通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号激活而促进宫颈癌细胞凋亡，降低其增殖、迁移和侵袭活性。
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