肿瘤坏死因子-α基因抑制耐药性人乳腺癌细胞的研究

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huangxl2000
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目的 观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因对耐药细胞生长的抑制作用及机制.方法 以重组逆转录病毒为载体将TNF-α基因导入耐药性人乳腺癌细胞系MCF7/ADR,获阳性克隆MCF7/ADR-TNF1与MCF7/ADR-TNF2.体外观察并比较野生型和转基因癌细胞的生长速度,流式细胞仪分析细胞周期的变化,端粒酶重复扩增实验(TRAP)综合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法测定端粒酶活性的变化.结果 MCF7/ADR-TNF1与MCF7/ADR-TNF2细胞中有TNF-α基因的整合和表达,病毒上清中TNF-α含量分别为1 737 μg/L(106个细胞/48 h)、2 875 μg/L.与阴性对照细胞相比,MCF7/ADR-TNF1与MCF7/ADR-TNF2细胞的生长速度明显减慢,生长抑制率分别为32.4%、54.8%,细胞周期阻滞于S+G2/M期,端粒酶活性降低.结论 外源性TNF-α基因的导入能有效抑制耐药细胞,阻滞细胞周期、抑制端粒酶活性可能为其主要机制.
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