东亚钳蝎神经毒素基因BmK IT3的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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东亚钳蝎毒素基因BmK IT3编码是由65个氨基酸残基组成的多肽物质.该类毒素为专一性作用于昆虫的抑制型神经毒素,它已被广泛用于研究离子通道作用机理[1];同时,它是研究蛋白质结构和功能的极好模型,是研究神经药理学的理想工具,将具有药理活性和昆虫毒性的基因导入细胞或动植物体内具有十分重要的应用价值.它对昆虫作用的专一性很高,对哺乳动物无害或毒性很小,可作为一种安全、有效的生物杀虫剂23.我们的研究是对该基因密码子进行优化,采用化学合成的方法合成了适于在昆虫中表达的BmK I T3的两条长的引物,通过搭桥法体外酶促合成而获得新基因BmK IT3R.由于检测方法受到一定限制,我们首先将该人工合成的基因与HIS6融合并在大肠杆菌中进行了表达,为进一步在昆虫体内表达时表达产物的检测方法的建立打下基础,并对蝎毒素的功能学研究进行有益的探索.
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