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摘 要：本文对补骨脂中有效成分的提取工艺进行了研究。采用超声回流提取、浸渍提取和单因素实验，得出超声回流提取是提取其有效成分的最佳方法。该方法条件为：补骨脂的颗粒为100～120目，超声波的频率为40 kHz，超声提取时间为30min，乙醇浓度为70%，固液比为1：8（ g ：mL），溶剂温度为40℃。在此最佳工艺条件下，补骨脂素的提取率可达3.1464%，提取率远高于普通溶剂提取率。
关键词：补骨脂；超声提取；浸渍提取
补骨脂（Psoralea corylifolia L.）又名破帮纸、兰苋、胡韭子或黑故子，为豆科植物补骨脂的干燥成熟果实. 补骨脂种子外形为肾形状，表面为黑色、黑褐色或灰褐色，且有微网状皱纹； 有芳香气味，并有辛味且略带苦味[1]. 补骨脂有很好的药用价值，具有温肾助阳、纳气、止泻功效，历代中医常用于治肾虚、滑精、小便频数、阳痿、腰膝冷痛、虚寒喘嗽等，外治用于皮肤病、白癫风、秃发等，其主要的生物活性成分为补骨脂素和异补骨脂素[2]。近年来，针对补骨脂发挥药效的物质基础，国内外学者进行了广泛研究[3]。本实验采用超声提取法和浸渍提取法对其有效成分提取工艺进行研究，通过单因素实验，比较了不同提取方法对香豆素类化合物提取率的影响，以期为补骨脂中有效活性成分的进一步开发利用提供依据。
一、试验材料与方法
（一）实验材料、仪器与试剂
材料：补骨脂购于湖北金贵中药饮片有限公司。
（二）实验方法
1、超声提取法
补骨脂药材75g，用80%乙醇600mL分3次常温下进行超声振荡提取，每次30min，过滤，合并滤液，回收乙醇至无醇味，放置过夜，倒去上清液得棕黑色黏稠物，将棕黑色黏稠物加20倍量甲醇分3次回流每次15min，趁热抽滤，合并滤液，浓缩至小体积，放置析晶，滤取结晶，80℃干燥，即得补骨脂素粗品，称重并计算提取率。
单因素实验：①乙醇浓度对总提取率的影响：准确称取25g补骨脂粉末5份，分别用50%、60%、70%、80%、90%的乙醇水溶液作溶剂，考察不同乙醇浓度对补骨脂有效成分提取率的影响。② 超声时间对总提取率的影响：在最佳乙醇浓度的基础上，准确称取25g补骨脂粉末5份，超声时间分别为20、30、40、50、60min，考察超声时间对补骨脂有效成分提取率的影响。③ 溶剂提取温度对总提取率的影响：在最佳乙醇浓度和时间的基础上，准确称取25g补骨脂粉末5份，实验时溶剂的温度分别为20、30、40、50、60℃，考察溶剂温度对提取率的影响。
2、浸渍提取法
称取补骨脂75g，用80%乙醇600mL分3次浸泡，每次24h合并3次滤液，回收乙醇至无醇味，放置过夜，倒去上清液得棕色黏稠物，将棕色黏稠物加20倍量甲醇分3次回流每次15min，趁热抽滤，合并滤液，浓缩至小体积，放置析晶，滤取结晶，80℃干燥即得补骨脂素粗品，称重，计算提取率。
单因素实验：①乙醇浓度对总提取率的影响：准确称取25g补骨脂粉末5份，分别用体积分数为50%、60%、70%、80%、90%的乙醇水溶液作溶剂，考察乙醇浓度对补骨脂有效成分提取率的影响。②浸渍时间对总提取率的影响：在最佳乙醇浓度的基础上，准确称取25g补骨脂粉末5份，浸提时间分别为20、30、40、50、60min，考察浸提时间对补骨脂有效成分提取率的影响。③溶剂提取温度对总提取率的影响：在最佳乙醇浓度和时间的基础上，准确称取25g补骨脂粉末5份，实验时溶剂的温度分别为20、30、40、50、60℃，考察溶剂温度对提取率的影响。
二、结果与分析
（一）超声提取法
1、单因素实验
（1）乙醇浓度对补骨脂总提取率的影响
由图1 可知，乙醇浓度在50%～90% 范围内，随着乙醇浓度的升高，提取率先增大后下降。当乙醇浓度为70%时，总提取率达到最大，故选择最佳乙醇浓度为70%作为溶剂。
图1乙醇浓度对补骨脂提取的影响
（2）超声提取时间对补骨脂总提取率的影响
由图2可知，在最佳乙醇浓度的基础上，随着时间的增加，补骨脂素的提取率先增大后下降。当时间为30min时，总提取率最大，故选择最佳超声提取时间为30min。
图2 超声时间对补骨脂提取的影响
（3）超声温度对补骨脂总提取率的影响
由图3可知，在最佳乙醇浓度和超声提取时间的基础上，提取率随着温度的增加，提取率先增加后减少。当温度为40℃时，总提取率达到最大，故选择最佳提取温度为40℃。
图3 超声温度对提取率的影响
（二）浸渍提取法
1、单因素实验
（1）乙醇浓度对补骨脂总提取率的影响
由图4可知，随着乙醇浓度的增加，提取率先增加后减少，当乙醇浓度为60%时，总提取率达到最大，故选择最佳乙醇浓度为60%。
图4乙醇浓度对提取率的影响
（2）浸渍提取时间对补骨脂总提取率的影响
由图5可知，在最佳乙醇浓度的基础上，随着浸渍时间增加提取率先增加后减少，当时间为20min时，总提取率达到最大，故选择最佳时间为20min。
图5 浸渍提取时间对提取率的影响
（3）提取温度对补骨脂总提取率的影响
由图6可知，在最佳乙醇浓度和提取时间的基础上，随着提取温度的增加提取率先增加后减少，当温度达到40℃时，总提取率达到最大，故选择最佳温度为40℃。
图6 提取温度对提取率的影响
三、分析与结论
由于补骨脂素和异补骨脂素是光敏性物质[4]，实验过程中不能保证绝对避光，因此，当时间过长时，超声的热效应过大，温度过高，导致提取率下降[5]。随着温度的升高，有利于传质和传热，使得提取率上升[6]； 但当温度过高时，可能会加速补骨脂素开环，从而又会使补骨脂素的提取率下降[7]。通过两种方法的单因素试验，优化得到补骨脂有效成分提取工艺为：
（1）超声波法最佳优化条件为70% 的乙醇水溶液作溶剂，补骨脂颗粒为100～120 目，超声频率40 kHz，超声时间30min，料液比为1：8（ g ：mL），超声提取温度40℃。最佳提取工艺条件下，补骨脂的有效成分的总提取率为3.1464%。
（2）浸渍法的最佳优化条件为50%的乙醇水溶液作溶剂，补骨脂颗粒为100～120 目，浸渍时间20min，料液比为1：8（ g ：mL），溶剂提取温度40℃。在最佳提取工艺条件下，补骨脂中有效成分的总提取率为0.5024%。比较两种方法在最佳工艺条件下的总提取率，结果显示在相同条件下，超声法提取有效成分的总提取率比浸渍法提取有效成分的总提取率高。
参考文献：
[1]刘志林，张相年，赵树进，等.补骨脂中补骨脂素的提取及纯化[J].第一军医大学学报，2005，（6）.
[2]林清，李劲平，粟会敏，李春艳.补骨脂的研究进展[J].咸宁学院学报：医学版，2012，（2）.
[3]林倩倩，赵淑杰，朱鹤.树舌灵芝中三萜类化合物的提取工艺研究[J].安徽农业科学，2012，（18）.
[4]刘德胜，郑红，韩景田，茅莓总黄酮提取工艺的优化[J].湖北农业科学，2012，（15）.
[5]唐霖，周长新，王明谦.补骨脂提取物的含量测定及其生产工艺研究[J].中成药，2008，（5）..
[6]余平，刘长姣，乔春峰，张守勤.利用超高压技术提取补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素[J].食品科学，2011，（20）.
[7]余淑珍，贾媛，王慧惠，刘志辉.补骨脂的超临界CO_2萃取工艺优选[J].中国实验方剂学杂志，2012，（10）.
作者简介：游林红（1973-），女，湖北武汉人，武汉生物工程学院制药工程系讲师，硕士学位，研究方向为：天然药物的提取分离纯化分析
关键词：补骨脂；超声提取；浸渍提取
补骨脂（Psoralea corylifolia L.）又名破帮纸、兰苋、胡韭子或黑故子，为豆科植物补骨脂的干燥成熟果实. 补骨脂种子外形为肾形状，表面为黑色、黑褐色或灰褐色，且有微网状皱纹； 有芳香气味，并有辛味且略带苦味[1]. 补骨脂有很好的药用价值，具有温肾助阳、纳气、止泻功效，历代中医常用于治肾虚、滑精、小便频数、阳痿、腰膝冷痛、虚寒喘嗽等，外治用于皮肤病、白癫风、秃发等，其主要的生物活性成分为补骨脂素和异补骨脂素[2]。近年来，针对补骨脂发挥药效的物质基础，国内外学者进行了广泛研究[3]。本实验采用超声提取法和浸渍提取法对其有效成分提取工艺进行研究，通过单因素实验，比较了不同提取方法对香豆素类化合物提取率的影响，以期为补骨脂中有效活性成分的进一步开发利用提供依据。
一、试验材料与方法
（一）实验材料、仪器与试剂
材料：补骨脂购于湖北金贵中药饮片有限公司。
（二）实验方法
1、超声提取法
补骨脂药材75g，用80%乙醇600mL分3次常温下进行超声振荡提取，每次30min，过滤，合并滤液，回收乙醇至无醇味，放置过夜，倒去上清液得棕黑色黏稠物，将棕黑色黏稠物加20倍量甲醇分3次回流每次15min，趁热抽滤，合并滤液，浓缩至小体积，放置析晶，滤取结晶，80℃干燥，即得补骨脂素粗品，称重并计算提取率。
单因素实验：①乙醇浓度对总提取率的影响：准确称取25g补骨脂粉末5份，分别用50%、60%、70%、80%、90%的乙醇水溶液作溶剂，考察不同乙醇浓度对补骨脂有效成分提取率的影响。② 超声时间对总提取率的影响：在最佳乙醇浓度的基础上，准确称取25g补骨脂粉末5份，超声时间分别为20、30、40、50、60min，考察超声时间对补骨脂有效成分提取率的影响。③ 溶剂提取温度对总提取率的影响：在最佳乙醇浓度和时间的基础上，准确称取25g补骨脂粉末5份，实验时溶剂的温度分别为20、30、40、50、60℃，考察溶剂温度对提取率的影响。
2、浸渍提取法
称取补骨脂75g，用80%乙醇600mL分3次浸泡，每次24h合并3次滤液，回收乙醇至无醇味，放置过夜，倒去上清液得棕色黏稠物，将棕色黏稠物加20倍量甲醇分3次回流每次15min，趁热抽滤，合并滤液，浓缩至小体积，放置析晶，滤取结晶，80℃干燥即得补骨脂素粗品，称重，计算提取率。
单因素实验：①乙醇浓度对总提取率的影响：准确称取25g补骨脂粉末5份，分别用体积分数为50%、60%、70%、80%、90%的乙醇水溶液作溶剂，考察乙醇浓度对补骨脂有效成分提取率的影响。②浸渍时间对总提取率的影响：在最佳乙醇浓度的基础上，准确称取25g补骨脂粉末5份，浸提时间分别为20、30、40、50、60min，考察浸提时间对补骨脂有效成分提取率的影响。③溶剂提取温度对总提取率的影响：在最佳乙醇浓度和时间的基础上，准确称取25g补骨脂粉末5份，实验时溶剂的温度分别为20、30、40、50、60℃，考察溶剂温度对提取率的影响。
二、结果与分析
（一）超声提取法
1、单因素实验
（1）乙醇浓度对补骨脂总提取率的影响
由图1 可知，乙醇浓度在50%～90% 范围内，随着乙醇浓度的升高，提取率先增大后下降。当乙醇浓度为70%时，总提取率达到最大，故选择最佳乙醇浓度为70%作为溶剂。
图1乙醇浓度对补骨脂提取的影响
（2）超声提取时间对补骨脂总提取率的影响
由图2可知，在最佳乙醇浓度的基础上，随着时间的增加，补骨脂素的提取率先增大后下降。当时间为30min时，总提取率最大，故选择最佳超声提取时间为30min。
图2 超声时间对补骨脂提取的影响
（3）超声温度对补骨脂总提取率的影响
由图3可知，在最佳乙醇浓度和超声提取时间的基础上，提取率随着温度的增加，提取率先增加后减少。当温度为40℃时，总提取率达到最大，故选择最佳提取温度为40℃。
图3 超声温度对提取率的影响
（二）浸渍提取法
1、单因素实验
（1）乙醇浓度对补骨脂总提取率的影响
由图4可知，随着乙醇浓度的增加，提取率先增加后减少，当乙醇浓度为60%时，总提取率达到最大，故选择最佳乙醇浓度为60%。
图4乙醇浓度对提取率的影响
（2）浸渍提取时间对补骨脂总提取率的影响
由图5可知，在最佳乙醇浓度的基础上，随着浸渍时间增加提取率先增加后减少，当时间为20min时，总提取率达到最大，故选择最佳时间为20min。
图5 浸渍提取时间对提取率的影响
（3）提取温度对补骨脂总提取率的影响
由图6可知，在最佳乙醇浓度和提取时间的基础上，随着提取温度的增加提取率先增加后减少，当温度达到40℃时，总提取率达到最大，故选择最佳温度为40℃。
图6 提取温度对提取率的影响
三、分析与结论
由于补骨脂素和异补骨脂素是光敏性物质[4]，实验过程中不能保证绝对避光，因此，当时间过长时，超声的热效应过大，温度过高，导致提取率下降[5]。随着温度的升高，有利于传质和传热，使得提取率上升[6]； 但当温度过高时，可能会加速补骨脂素开环，从而又会使补骨脂素的提取率下降[7]。通过两种方法的单因素试验，优化得到补骨脂有效成分提取工艺为：
（1）超声波法最佳优化条件为70% 的乙醇水溶液作溶剂，补骨脂颗粒为100～120 目，超声频率40 kHz，超声时间30min，料液比为1：8（ g ：mL），超声提取温度40℃。最佳提取工艺条件下，补骨脂的有效成分的总提取率为3.1464%。
（2）浸渍法的最佳优化条件为50%的乙醇水溶液作溶剂，补骨脂颗粒为100～120 目，浸渍时间20min，料液比为1：8（ g ：mL），溶剂提取温度40℃。在最佳提取工艺条件下，补骨脂中有效成分的总提取率为0.5024%。比较两种方法在最佳工艺条件下的总提取率，结果显示在相同条件下，超声法提取有效成分的总提取率比浸渍法提取有效成分的总提取率高。
参考文献：
[1]刘志林，张相年，赵树进，等.补骨脂中补骨脂素的提取及纯化[J].第一军医大学学报，2005，（6）.
[2]林清，李劲平，粟会敏，李春艳.补骨脂的研究进展[J].咸宁学院学报：医学版，2012，（2）.
[3]林倩倩，赵淑杰，朱鹤.树舌灵芝中三萜类化合物的提取工艺研究[J].安徽农业科学，2012，（18）.
[4]刘德胜，郑红，韩景田，茅莓总黄酮提取工艺的优化[J].湖北农业科学，2012，（15）.
[5]唐霖，周长新，王明谦.补骨脂提取物的含量测定及其生产工艺研究[J].中成药，2008，（5）..
[6]余平，刘长姣，乔春峰，张守勤.利用超高压技术提取补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素[J].食品科学，2011，（20）.
[7]余淑珍，贾媛，王慧惠，刘志辉.补骨脂的超临界CO_2萃取工艺优选[J].中国实验方剂学杂志，2012，（10）.
作者简介：游林红（1973-），女，湖北武汉人，武汉生物工程学院制药工程系讲师，硕士学位，研究方向为：天然药物的提取分离纯化分析