探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在胆囊癌中的表达、临床意义及其在二甲双胍抑制胆囊癌GBC-SD细胞转移中的作用及机制。
方法收集2016年6月至2017年2月在郑州大学第一附属医院接受外科手术的24例患者的胆囊癌组织和5例慢性胆囊炎组织，免疫组化及实时荧光定量(qPCR)检测胆囊癌、癌旁及慢性胆囊炎中HIF-1α表达，分析其临床意义；利用低氧环境培养诱导胆囊癌转移；分别采用划痕试验及Transwell侵袭小室检测细胞转移能力，应用蛋白印迹(Western blot)技术及免疫荧光检测细胞HIF-1α及VEGF表达量，应用2-甲氧基雌二醇(2-MeoE2)特异性抑制HIF-1α表达。
结果胆囊癌组织中HIF-1α阳性表达率高于癌旁组织，差异有统计学意义(P<0.05)。患者HIF-1α阳性率与胆囊癌的淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05)。对照组(常氧)及低氧(1% O2)组患者48 h划痕修复率分别为(46.5±4.8)%、(67.3±4.0)%；对照组及低氧组患者24 h穿膜细胞数分别为(147.4±11.7)个、(234.4±17.7)个。与对照组相比，低氧组胆囊癌GBC-SD细胞转移能力增加，HIF-1α及VEGF表达量增加(P<0.05)。对照组、二甲双胍组、低氧组、二甲双胍联合低氧组48 h划痕修复率分别为(40.6±7.1)%、(16.4±9.4)%、(69.5±4.0)%、(22.4±7.4)%；对照组、二甲双胍组、低氧组、二甲双胍联合低氧组24 h穿膜细胞数分别为(148.4±6.9)个、(90.0±8.4)个、(185.8±10.2)个、(113.4±8.6)个。与低氧组比较，二甲双胍抑制低氧诱导胆囊癌细胞转移，同时HIF-1α及VEGF表达量下降(P<0.05)。对照组、2-MeoE2组、低氧组、2-MeoE2联合低氧组48 h划痕修复率分别为(43.4±4.4)%、(25.9±9.0)%、(63.3±2.2)%、(46.2±4.5)%。对照组、2-MeoE2组、低氧组、2-MeoE2联合低氧组24 h穿膜细胞数分别为(144.2±12.6)个、(80.2±7.7)个、(203.8±7.0)个、(124.0±5.2)个。与低氧组比较，应用HIF-1α特异性阻断剂2MeoE2后，抑制低氧诱导胆囊癌细胞转移，VEGF表达量下降(P<0.05)。
结论HIF-1α的表达与胆囊癌的淋巴结转移及TNM分期相关，低氧处理可增加HIF-1α及VEGF表达，促进GBC-SD细胞转移。二甲双胍可通过抑制HIF-1α/VEGF途径抑制低氧诱导胆囊癌GBC-SD细胞转移。