【摘 要】
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目的研究总RNA起始量、接头稀释比例、聚合酶链反应(PCR)循环数3种不同条件对脑组织miRNA建库测序结果的影响，为进一步摸索脑脊液miRNA微量建库方法提供依据。方法基于测序数据量、检测的miRNA数量、定量准确性3个指标，比较总RNA起始量、接头稀释及PCR循环数3种不同条件对建库测序质量的影响。结果常量(1 μg)建库中，进行接头稀释及22个PCR循环数的文库测序质量最好；微量(10 ng
【机 构】
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310013 杭州，浙江医院神经内科 浙江中医药大学第二临床医学院,310013 杭州，浙江医院神经内科 浙江中医药大学第二临床医学院,
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目的研究总RNA起始量、接头稀释比例、聚合酶链反应(PCR)循环数3种不同条件对脑组织miRNA建库测序结果的影响，为进一步摸索脑脊液miRNA微量建库方法提供依据。
方法基于测序数据量、检测的miRNA数量、定量准确性3个指标，比较总RNA起始量、接头稀释及PCR循环数3种不同条件对建库测序质量的影响。
结果常量(1 μg)建库中，进行接头稀释及22个PCR循环数的文库测序质量最好；微量(10 ng)建库中，接头稀释及提高PCR扩增循环同样会提高测序数据质量，但与芯片定量结果相关性均较常量建库低。
结论RNA起始量对建库测序质量影响最大，微量建库定量准确性整体低于常量建库，微量建库中应适当增加PCR循环数。
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