靶向CCR7基因shRNA表达载体的构建及鉴定

来源 :华中医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Ratawo

【摘要】

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目的设计并构建靶向CCR7基因shRNA真核表达质粒，并检测其干扰效果。方法以CCR7为靶基因设计具有短发夹结构的模板寡核苷酸，退火形成互补双链结构，再克隆至pGC-silencer-CRM30载

【作者】

：

孙仁虎李疆崔静吕清刘兴华王国斌

【机构】

：

华中科技大学同济医学院附属协和医院腹腔镜中心

【出处】

：

华中医学杂志

【发表日期】

：

2009年1期

【关键词】

：

RNA干扰短发卡RNA 趋化因子 CCR7 RNA interference shRNA expression vector Chemokine CCR7

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目的设计并构建靶向CCR7基因shRNA真核表达质粒，并检测其干扰效果。方法以CCR7为靶基因设计具有短发夹结构的模板寡核苷酸，退火形成互补双链结构，再克隆至pGC-silencer-CRM30载体，构建的3条重组短发夹shRNA表达载体分别命名为pGC-silencer-CRM30-CCR7A、-CCR7B和-CCR7C。采用测序法鉴定寡核苷酸序列。将构建好的真核表达载体转染人结肠癌SW480细胞，荧光显微镜观察转染效果，RT-PCR法检测CCR7干扰效率。结果重组质粒测序结果与Genebank中的CC

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