【摘 要】
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目的观察标记引物法、随机渗入标记法、末端转移标记法三种荧光标记法对寡核苷酸芯片杂交信号的影响.方法将淋球菌gyrA基因91位密码子突变型探针倍比稀释成终浓度为1 000 μm
【机 构】
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安徽医科大学皮肤性病研究所、第一附属医院皮肤性病科,中国科学院上海微系统与信息技术研究所
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目的观察标记引物法、随机渗入标记法、末端转移标记法三种荧光标记法对寡核苷酸芯片杂交信号的影响.方法将淋球菌gyrA基因91位密码子突变型探针倍比稀释成终浓度为1 000 μmol/L～0.25 μmol/L的梯度浓度点样并制作寡核苷酸芯片,PCR扩增荧光标记包含gyrA基因突变的目的DNA片段,与芯片杂交,分别记录三种标记方法的杂交信号强度.结果标记引物法的荧光信号最强,随机渗入标记法的荧光信号强度次之,其Cy5-dUTP最佳浓度为0.1 mmol/L(dTTP:Cy5-dUTP=10∶1),末端转移标记
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