【摘 要】
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目的实现志贺菌候选抗原rstxB-phoE的胞膜表面表达。方法本研究利用融合PCR技术(SOEPCR)构建可以表达rstxB-phoE的重组菌,并通过蛋白杂交、免疫胶体金电镜等手段证明重组蛋白
【机 构】
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浙江中医药大学基础医学院,河南省疾病预防控制中心免疫与预防规划所,杭州市疾病预防控制中心微生物检验科,
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目的实现志贺菌候选抗原rstxB-phoE的胞膜表面表达。方法本研究利用融合PCR技术(SOEPCR)构建可以表达rstxB-phoE的重组菌,并通过蛋白杂交、免疫胶体金电镜等手段证明重组蛋白在细胞中的定位。连续传代鉴定重组株的遗传稳定性。结果一段长21个氨基酸的stxB肽段通过phoE蛋白载体准确递呈到了细菌胞膜表面,重组蛋白的表达对细菌的生长没有产生明显影响,且连续传代结果表明重组株的良好遗传稳定性。结论本实验基于SOE-PCR技术初步构建了可以表面递呈rstxB-phoE重组蛋白并稳定遗传的重组菌株,为开发新型志贺菌疫苗打下基础。其免疫作用需通过动物实验进一步鉴定。
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