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目的 利用电穿孔技术,将人端粒酶催化亚基(hTERT)转染至SD大鼠许旺细胞,观察及检测外源性hTERT在许旺细胞内表达及对许旺细胞寿命及增殖能力的影响.方法 从食管癌组织中提取hTERT RNA,构建pcDNA3.1-hTERT质粒,利用电穿孔技术,转染许旺细胞,PCR检测hTERTRNA,TRAP-PCR银染法端粒酶活性检测试剂盒检测端粒酶活性,PI-annexin V染色,流式细胞仪测第15代转染及未转染ADSCs细胞凋亡.并且绘制15代转染及未转染细胞传代次数及传代时问曲线.结果 成功构建pcDNA3.1-hTERT质粒.转染后,许旺细胞内hTERT RNA表达,并且TRAP端粒酶活性检测结果为阳性,许旺细胞标志物S100阳性,转染后细胞传代能力较未转染细胞显著增强.结论 成功构建hTERT-许旺细胞.为构建许旺细胞永生化细胞系打下基础。