【摘 要】
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目的 观察小干扰RNA(siRNA)抑制大鼠垂体生长激素腺瘤(GH3)细胞中垂体特异性转录因子-1(Pit-1)基因的表达对其生物学行为的影响.方法 设计合成针对Pit-1基因的siRNA,经脂质体包裹转染GH3细胞.采用Western blot、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测siRNA作用后,Pit-1蛋白和Pit-1 mRNA表达的变化；应用细胞计数试剂盒(CCK-8)进行细胞增殖
【机 构】
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221002江苏,徐州医学院附属医院神经外二科,221002江苏,徐州医学院附属医院神经外二科,221002江苏,徐州医学院附属医院神经外二科,221002江苏,徐州医学院附属医院神经外二科,2210
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目的 观察小干扰RNA(siRNA)抑制大鼠垂体生长激素腺瘤(GH3)细胞中垂体特异性转录因子-1(Pit-1)基因的表达对其生物学行为的影响.方法 设计合成针对Pit-1基因的siRNA,经脂质体包裹转染GH3细胞.采用Western blot、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测siRNA作用后,Pit-1蛋白和Pit-1 mRNA表达的变化；应用细胞计数试剂盒(CCK-8)进行细胞增殖-毒性检测法检测细胞生长增殖的变化；应用流式细胞仪检测细胞凋亡的变化；制备Transwell小室测定GH3细胞体外侵袭能力的变化.结果 siRNA显著抑制Pit-1蛋白和mRNA的表达,与阴性对照组比较siRNA组GH3细胞增殖能力降低,36、48 h吸光度(A)值分别减少了0.46、0.41；24、36、48 h凋亡率分别增加了3.17％、6.36％、8.46％；侵袭力减弱,24、36、48 h穿膜细胞数分别减少了38.43、46.54、38.13个,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Pit-1 siRNA能够有效抑制GH3细胞的生长,促进其凋亡,降低侵袭力。
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