重组hpAKP逆转录病毒载体的构建及其在新生小鼠脑内的表达

来源 :中国当代儿科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hermes262
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目的 探索逆转录病毒载体(RV)作为新生儿神经系统疾病基因治疗载体的可行性及靶基因在其脑内表达特点。方法 将从质粒DAP获得的报告基因人胎盘碱性磷酸酶(hpAKP)克隆至RV pLXSN,用脂质体转染法导入包装细胞系PT67,获得高滴度的重组病毒。将其注射入生后1 d的小鼠脑内,通过原位杂交、酶组化法,检测hpAKP在新生小鼠脑内的表达。通过免疫组化法,确定所转染细胞的种类。结果 注射后,新生鼠脑内hpAKP表达渐增高,但28 d表达已较前减弱。RV转染的细胞位于皮层的Ⅱ~Ⅴ层锥体细胞、脑干神经核,小脑P
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