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目的通过观察补肾活血方含药血清对人成骨细胞的增殖分化的影响,研究补肾活血方对p38 MAPK和PI3K/Akt信号转导通路的活性相互关联及影响,以探讨补肾活血方临床防治骨质疏松症的作用机制。方法将人成骨细胞株分为空白组(Control组)、补肾活血方含药血清组(Z组)、含药血清+p38 MAPK通路抑制剂SB203580组(SB组),含药血清+PI3K/Akt通路抑制剂LY294002组(LY组)、含药血清+SB203580+LY294002组(SB+LY组),通过四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测成骨细胞的增殖情况,生化方法分析检测成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)的活性,采用Western blot法检测p38 MAPK通路磷酸化p38(p-p38)和PI3K/Akt通路磷酸化AKT(p AKT)的表达水平。结果补肾活血方含药血清能促进成骨细胞的增殖,使成骨细胞的分化增强,与Control组比较差异均有统计学意义(P<0.01);阻断p38 MAPK通路后,对成骨细胞的增殖无明显抑制(P>0.05),而阻断PI3K/Akt通路后细胞增殖下降(P<0.01);两条通路对成骨细胞的分化功能均有显著抑制作用(P<0.01);Western blot结果显示,补肾活血方含药血清能刺激p-p38和p Akt表达,阻断p38 MAPK和PI3K/Akt信号转导通路后,p-p38含量和p Akt明显减少(P<0.01);补肾活血方激活的两条通路之间存在一定的关联性,可互相影响。结论补肾活血方通过PI3K/AKT信号通路调控成骨细胞的增殖,通过同时激活p38 MAPK和PI3K/AKT两条信号通路介导成骨细胞的分化,这可能是补肾活血方临床治疗OP的作用机制之一。